細(xì)胞生物學(xué)

我司為廣大客戶提供基于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)技術(shù)服務(wù)，為確保您的項(xiàng)目進(jìn)展順利，我們一律采用GIBCO品牌原裝進(jìn)口試劑(血清和培養(yǎng)基等)。服務(wù)項(xiàng)目包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞模型建立、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定細(xì)胞系建立、細(xì)胞增殖/抑制、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡檢測(cè)等。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定細(xì)胞系建立及細(xì)胞模型

服務(wù)內(nèi)容

一、細(xì)胞轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株篩選

通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑或電穿孔方式等方式，將目的基因?qū)氚屑?xì)胞24-48小時(shí)后，目的基因即在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。此時(shí)為了建立穩(wěn)定細(xì)胞系，可根據(jù)不同基因載體中所含的抗性標(biāo)記，選用相應(yīng)的藥物對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行篩選，從而得到穩(wěn)定表達(dá)外源基因的細(xì)胞克隆。觀察目的基因及其表達(dá)蛋白在某種細(xì)胞中的功能（短時(shí)間即可進(jìn)行觀察，但效應(yīng)會(huì)很快丟失）。

二、針對(duì)不同種類細(xì)胞使用藥物，低氧，壓力等外源因素進(jìn)行刺激等處理，建立相關(guān)的細(xì)胞模型，從而進(jìn)行后續(xù)的研究工作。

服務(wù)特點(diǎn)

1、針對(duì)不同細(xì)胞系篩選合適的轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒濃度配比，提高轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)量

2、豐富的抗生素篩選經(jīng)驗(yàn)和單細(xì)胞克隆鑒定方法提高實(shí)驗(yàn)效率

3、構(gòu)建的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株可穩(wěn)定傳代，極少發(fā)生性狀丟失

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)

客戶提供

1、待克隆基因和載體信息，待敲低基因信息和shRNA序列信息（如無(wú)相關(guān)shRNA序列信息，本公司可代為設(shè)計(jì)并收取相關(guān)費(fèi)用）；

2、待轉(zhuǎn)染細(xì)胞株（如需使用常用腫瘤細(xì)胞株，如293/293T、HeLa等可由本公司提供）；

3、陽(yáng)性對(duì)照樣品（盡量提供）

4、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）

公司交付

1、細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率評(píng)價(jià)結(jié)果（GFP熒光表達(dá)）

2、WB檢測(cè)蛋白表達(dá)結(jié)果

3、敲低表達(dá)shRNA相關(guān)載體和菌液

4、穩(wěn)定敲低細(xì)胞株或過(guò)表達(dá)細(xì)胞株

5、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

細(xì)胞生物學(xué)特性和功能學(xué)檢測(cè)

服務(wù)內(nèi)容

一、細(xì)胞生長(zhǎng)，增殖/抑制曲線

不同種類的細(xì)胞具有不同的生長(zhǎng)速率，同一株細(xì)胞在不同的培養(yǎng)條件和處理下其生長(zhǎng)速率也會(huì)發(fā)生很大改變。細(xì)胞的生長(zhǎng)速率是反應(yīng)細(xì)胞狀態(tài)和外界刺激對(duì)細(xì)胞影響的一個(gè)重要指標(biāo)。使用MTT和CCK-8方法對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)和處理?xiàng)l件下活細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)OD值判斷細(xì)胞密度及生長(zhǎng)速率。

二、克隆形成實(shí)驗(yàn)

與細(xì)胞生長(zhǎng)曲線實(shí)驗(yàn)類似。細(xì)胞克隆形成率表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量，反應(yīng)的是具有貼壁和有增殖活力的細(xì)胞數(shù)目?？寺⌒纬陕史从臣?xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。是檢測(cè)細(xì)胞在正常和外界刺激條件下形成克隆的能力，間接反應(yīng)細(xì)胞狀態(tài)的好壞和外界處理的作用。

三、細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)

活體細(xì)胞通常都具有一定的遷移能力，不同細(xì)胞的遷移能力不同。與遷移相類似的能力是侵襲，具有裂解細(xì)胞基質(zhì)的能力的細(xì)胞通常具有較強(qiáng)的侵襲能力。大部分腫瘤細(xì)胞的遷移能力較強(qiáng)，這也是反應(yīng)腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要指標(biāo)。研究中通常會(huì)先對(duì)細(xì)胞的遷移能力進(jìn)行檢測(cè)，再進(jìn)一步觀察該細(xì)胞是否具有侵襲能力。在進(jìn)行遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們會(huì)選擇多種方法在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。綜合判斷某種細(xì)胞的遷移和侵襲能力。

四、細(xì)胞周期和凋亡檢測(cè)

細(xì)胞周期指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束為止的全過(guò)程，可分為間期與分裂期兩個(gè)階段。在這一過(guò)程中，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞完成有限的分裂之后會(huì)逐漸衰老死亡，這一過(guò)程被稱為凋亡。不同的蛋白或者藥物等會(huì)對(duì)細(xì)胞周期產(chǎn)生一定的影響，進(jìn)一步影響細(xì)胞增殖速率。凋亡作為一種細(xì)胞常見的死亡方式易受到外界環(huán)境和刺激的影響，隨著細(xì)胞內(nèi)Caspase的激活，凋亡通路發(fā)生活化，進(jìn)一步誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。目前有多種方法可以檢測(cè)細(xì)胞凋亡，如Tunel，Annexin V+PI雙染色等，也可以通過(guò)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)反應(yīng)細(xì)胞凋亡情況。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)和服務(wù)周期

客戶提供

1. 待檢測(cè)細(xì)胞系

2. 目的基因名稱和信息（NCBI號(hào)）

3. 待轉(zhuǎn)染質(zhì)?；蚓?/span>

4. 目的蛋白一抗

公司交付

1. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖片（如流式結(jié)果圖，WB圖等）

2. 完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告