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冰凍切片,免疫組化,檢測GFP,丙酮是否有影響?

發(fā)表時間:2017-05-25
你說做GFP的檢測。
GFP本身就是發(fā)光的啊,直接檢測就行了,不需要做IF或者IHC啊。擔(dān)心丙酮固定有影響,可以試試多聚甲醛4%。
真是想用丙酮的話,可以試試嗎,看看結(jié)果跟你的預(yù)想的差別多大。
此外,不用擔(dān)心淬滅,實(shí)在不行,直接用抗GFP的抗體檢測,可以用其他的顏色的光,比如紅色的熒光二抗。

直接看熒光顯微鏡,在共聚焦下看過了,也不能區(qū)分是否是自發(fā)熒光,現(xiàn)在買了抗GFP的抗體,想通過組化來檢測組織中是否有GFP。
你的意思是把冰凍組化過程中用丙酮的部分替換成PFA就行了嗎?
不用擔(dān)心淬滅,是指即使用丙酮,熒光淬滅了,也可以用抗體檢測到嗎?

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