酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)(TSA，Tyramide signal amplification)又稱為催化信號(hào)放大技術(shù)(CSA，catalyzedsignal amplification)，其從產(chǎn)生到現(xiàn)在已有近二十年的發(fā)展時(shí)間，目前應(yīng)用較為廣泛。TSA技術(shù)是一類利用HRP對(duì)靶抗原進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法，其不但可以用于IF/IHC的信號(hào)放大，亦可用于Elisa、ISH等檢測(cè)。可與高性能染料Alexa Fluor、傳統(tǒng)熒光染料、酶系統(tǒng)和比色檢測(cè)系統(tǒng)相兼容，本帖主要討論一下其在IHC/IF中的應(yīng)用。
原理
   TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過(guò)氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價(jià)鍵結(jié)合位點(diǎn))，產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物，該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合，這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團(tuán)結(jié)合，經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大，可以結(jié)合大量的酶分子or熒光基團(tuán)，結(jié)果使其檢測(cè)信號(hào)得到幾何級(jí)放大。

應(yīng)用
1、TSA技術(shù)可以用于檢測(cè)用傳統(tǒng)方法無(wú)法檢出的低豐度靶標(biāo)?；诶阴０返男盘?hào)放大技術(shù)能夠提供極強(qiáng)的敏感度、檢測(cè)極微量的目的抗原。
2、極大的降低抗體的用量，節(jié)約抗體，實(shí)測(cè)確實(shí)可以顯著提升抗體的稀釋比例。有廠家宣稱在保證結(jié)果下可以降低抗體的1000倍的使用量。
3、簡(jiǎn)單的孵育步驟對(duì)樣本進(jìn)行處理，即可獲得樣本的多色標(biāo)記信號(hào)，對(duì)于不同類型抗原進(jìn)行檢測(cè)，如核酸及蛋白的同時(shí)標(biāo)記檢測(cè)；同時(shí)，該技術(shù)可與其他信號(hào)放大系統(tǒng)或傳統(tǒng)標(biāo)記方法聯(lián)合使用。
4、同一來(lái)源種屬抗體的多重標(biāo)記免疫組化實(shí)驗(yàn)，利用檢測(cè)試劑的敏感性差異可以完成多重?zé)晒鈽?biāo)記。
缺點(diǎn)
1、對(duì)于非特異性信號(hào)無(wú)法去除，隨信號(hào)增強(qiáng)而升高，實(shí)測(cè)確實(shí)如此，具有一定的非特異性擴(kuò)增。
2、目前市售的試劑盒價(jià)格價(jià)格較高，除非特殊情況，一般很少研究人員愿意嘗試。