幾種檢測支原體是否污染的方法

分離培養(yǎng)法：

分離培養(yǎng)法是支原體檢測的金標(biāo)方法，其檢測精確度最高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，并接種到最適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會在這種瓊脂平板上瘋狂生長，最終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此被譽為支原體檢測金標(biāo)準(zhǔn)。不過分離培養(yǎng)法也存在兩個弊端，一是檢測時間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。二是盡管可以檢測絕大多數(shù)支原體種類，分離培養(yǎng)法也有力所不及的時候。

如果你實在不想等這么久，或者希望在分離培養(yǎng)法的等待過程中先拿到初步結(jié)果，你可以試一試DNA、PCR或酶學(xué)檢測方法。不過需要注意的是，上述檢測方法都不能單獨檢出所有類型的支原體，而且靈敏度也沒有分離培養(yǎng)法高，所以最好結(jié)合使用兩種方法以獲得最可靠的檢測結(jié)果。

PCR法：

PCR法也可以檢測M. hyorhinis菌株，PCR法檢測支原體只需幾個小時，是最快但也是最不靈敏的支原體檢測方法。該方法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本，其中PCR引物通常針對支原體的16S rRNA基因。在凝膠電泳過程中，支原體DNA會顯示為特異性條帶，以此指示支原體的存在。PCR法可以檢測大多數(shù)支原體，但謹(jǐn)慎起見最好同時使用另一種檢測方法來進行驗證。

酶學(xué)檢測和ELISA：

此外，也還存在一些其他支原體檢測方法。例如酶學(xué)檢測是將可疑樣本添加到特定底物中，在這一體系內(nèi)支原體的酶可以將ADP轉(zhuǎn)化為ATP，隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測，以ELISA法為基礎(chǔ)的支原體檢測一般使用針對支原體16S rRNA基因的帶標(biāo)記探針或抗體，來檢測培養(yǎng)物中是否含有支原體。