ELISA試劑盒的蛋白質(zhì)局部濃縮

ELISA試劑盒蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。

為您詳解樣品的各步操作方法：

A、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

B、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測，1000×g離心30分鐘去除顆粒。

C、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，使用不含熱原的試管，收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

D、組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎，1000×g離心10分鐘，取上清液。

E、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍，盡可能的不要使用溶血或高血脂血，如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾，不要在37℃或更高的溫度加熱解凍，應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、ELISA試劑盒收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。