在一般的概念里,不需復(fù)雜設(shè)備,甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對質(zhì)量控制意識的加強,盡可能做到最低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動強度等觀念的不斷改進,解決ELISA試劑盒技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的系統(tǒng)誤差問題及高效率運作問題導(dǎo)致了自動化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的科學(xué)地、有機地、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動化ELISA技術(shù)的理論基。
血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清,制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用,血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HR也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng).如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深.一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃。超過一周測定的需低溫冰存、凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和。