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| 產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
| 品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
| 貨號(hào) | kl-CC101363 |
| 保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
| 英文名稱 | HES3.2 |
| 保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
HES3.2人胚胎干細(xì)胞完全培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣；多角形
細(xì)胞傳代：1:2-1:4傳代；每周2-3次
HES3.2人胚胎干細(xì)胞凍存步驟：我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化，有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞，不同細(xì)胞離心率不一樣（以上僅為貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞收集就用第四部）
⑸ 吸出離心管上清液，加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞，移到凍存管，放4度半小時(shí)，-20 度兩小時(shí)，-70度過(guò)夜，再放液氮長(zhǎng)期保存。
HES3.2人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下：
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫，回溫后將其用75%酒精擦拭，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)；
2 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套之后，從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入，需擰松凍存管，排出內(nèi)部殘留的液氮，之后擰緊凍存管，放入37-40℃水浴中，并不時(shí)搖動(dòng)，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi)；
3 在1,000 rpm下離心5～10分鐘，棄去上清液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng)；
4 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高，及時(shí)傳代；否則，及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
HES3.2人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下：
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全，尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入，請(qǐng)一定要擰松凍存管，排出液氮，防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同，須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素（G418等），以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
RMC KL1594 大鼠腦膜細(xì)胞,RMC細(xì)胞
F98-RFP-puro KL1595 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,F98-RFP-puro細(xì)胞
JRDC084 KL1596 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞, C6
C6-RFP KL1597 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6-RFP細(xì)胞
C6-EGFP-puro KL1598 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6-EGFP-puro細(xì)胞
DI TNC1 KL1599 大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞,DI TNC1細(xì)胞
NUTU-19 KL1600 大鼠卵巢癌細(xì)胞株 NUTU-19細(xì)胞
MC KL1601 大鼠巨噬細(xì)胞,MC細(xì)胞
C6 KL1602 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞
JRDC131 KL1603 大鼠回腸細(xì)胞,IEC-18細(xì)胞, IEC-18
KL1604 大鼠滑膜細(xì)胞
IR983F KL1605 大鼠骨髓瘤細(xì)胞IR983F細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3 KL1606 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,Y3-Ag1.2.3細(xì)胞
CASC258 KL1607 大鼠骨肉瘤細(xì)胞,UMR-106細(xì)胞, UMR-106
VMR106 KL1608 大鼠骨肉瘤 VMR106細(xì)胞
L6 KL1609 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞
JRDC087 KL1610 大鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞, HSC-T6
CFSC-8B KL1611 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞
CFSC-3H & 5H KL1612 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-3H & 5H細(xì)胞
CFSC-2G KL1613 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞
H-4-Ⅱ-E KL1614 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞,H-4-Ⅱ-E細(xì)胞
H4-II-E-C3 KL1615 大鼠肝細(xì)胞瘤 H4-II-E-C3細(xì)胞
IAR20 KL1616 大鼠肝細(xì)胞,IAR20細(xì)胞
BRL KL1617 大鼠肝細(xì)胞,BRL細(xì)胞
BRL大鼠Buffalo KL1618 大鼠肝細(xì)胞,BRL大鼠Buffalo細(xì)胞
BRL 3A KL1619 大鼠肝細(xì)胞,BRL 3A細(xì)胞
WB-F344 KL1620 大鼠肝上皮樣干細(xì)胞,WB-F344細(xì)胞
Walker-256 KL1621 大鼠肝癌細(xì)胞（乳腺癌細(xì)胞接種到*成瘤） Walker-256細(xì)胞
CBRH7919 KL1622 大鼠肝癌細(xì)胞（wistar 大鼠） CBRH7919細(xì)胞
LGZC212 KL1623 大鼠肝癌細(xì)胞,Walker-256細(xì)胞, Walker-256
RH-35 KL1624 大鼠肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞
H4-II-E-C3 KL1625 大鼠肝癌細(xì)胞,H4-II-E-C3細(xì)胞
