產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101366 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | E1C2 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
E1C2人胚胎干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
E1C2人胚胎干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
E1C2人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
E1C2人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
TC-jcyj0117 KL1496 糞腸球菌(高耐) ATCC 51299
TC-jcyj0081 KL1497 糞腸球菌 ATCC 29212
KL1498 糞產(chǎn)堿菌 ATCC8750
KL1499 糞產(chǎn)堿桿菌 ATCC 31555
KL1500 粉狀畢赤酵母 CICC 1688
KL1501 費(fèi)氏志賀氏菌 CMCC 51574
TC-jcyj0121 KL1502 肺炎鏈球菌 ATCC 49619
KL1503 肺炎克雷伯氏菌 ATCC 10031
TC-jcyj0020 KL1504 肺炎克雷伯菌
// KL1505 肺腺癌細(xì)胞,SPC-A-1細(xì)胞 SPC-A-1
// KL1506 肺腺癌細(xì)胞,LTEP-a-2細(xì)胞 LTEP-a-2
HTB-58 KL1507 肺鱗癌細(xì)胞,SK-MES-1細(xì)胞 SK-MES-1
// KL1508 肺扁平上皮癌細(xì)胞,QG-56細(xì)胞 QG-56
CRL-1848 KL1509 肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)NCI-H292細(xì)胞 NCI-H292
// KL1510 肺癌細(xì)胞,LLC Lewis細(xì)胞 LLC Lewis
CCL-185 KL1511 肺癌細(xì)胞,A549 [A-549]細(xì)胞 A549 [A-549]
TIB-64 KL1512 肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞,P815細(xì)胞 P815
KL1513 菲律賓鏈霉菌 DSMZ40112=ATCC23905
Vero KL1514 非洲綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞
VERO C1008 (E6) KL1515 非洲綠猴腎細(xì)胞,VERO C1008 (E6)細(xì)胞
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] KL1516 非洲綠猴腎細(xì)胞,CV-1細(xì)胞
COS-6 KL1517 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-6細(xì)胞
COS-1 KL1518 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞
VERO C1008 (E6) KL1519 非洲綠猴非洲綠猴腎細(xì)胞,VERO C1008 (E6)細(xì)胞
CV-1 KL1520 非洲綠猴非洲綠猴腎細(xì)胞,CV-1細(xì)胞
monkey COS-7 KL1521 非洲綠猴sv40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞,monkey COS-7細(xì)胞
COS-1 KL1522 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞
Tsu-Prl KL1523 非雄激素依賴型前列腺癌 Tsu-Prl細(xì)胞
TC-jcyj0154 KL1524 非01群霍亂弧菌
KL1525 放射性根瘤菌 ATCC15955
CCL-136 KL1526 惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,RD細(xì)胞 RD
CRL-1619 KL1527 惡性黑色素瘤細(xì)胞,A-375 [A375]細(xì)胞 A-375 [A375]
TC-jcyj0026 KL1528 惡臭假單胞菌