|
| 產(chǎn)地 | 中國/美國 |
| 品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
| 貨號(hào) | kl-CC101367 |
| 保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
| 英文名稱 | E1C4 |
| 保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
E1C4人胚胎干細(xì)胞完全培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣；多角形
細(xì)胞傳代：1:2-1:4傳代；每周2-3次
E1C4人胚胎干細(xì)胞凍存步驟：我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化，有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞，不同細(xì)胞離心率不一樣（以上僅為貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞收集就用第四部）
⑸ 吸出離心管上清液，加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞，移到凍存管，放4度半小時(shí)，-20 度兩小時(shí)，-70度過夜，再放液氮長期保存。
E1C4人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下：
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫，回溫后將其用75%酒精擦拭，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)；
2 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套之后，從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入，需擰松凍存管，排出內(nèi)部殘留的液氮，之后擰緊凍存管，放入37-40℃水浴中，并不時(shí)搖動(dòng)，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi)；
3 在1,000 rpm下離心5～10分鐘，棄去上清液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng)；
4 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高，及時(shí)傳代；否則，及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
E1C4人胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下：
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全，尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入，請(qǐng)一定要擰松凍存管，排出液氮，防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同，須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素（G418等），以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
LM3 KL1463 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞,LM3細(xì)胞
// KL1464 高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞,HO-8910PM細(xì)胞 HO-8910PM
// KL1465 高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-D細(xì)胞 95-D
// KL1466 肝細(xì)胞,HL-7702細(xì)胞 HL-7702
HOC KL1467 肝卵圓細(xì)胞,HOC細(xì)胞
HHVEC KL1468 肝瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞,HHVEC 細(xì)胞
CRL-8024 KL1469 肝癌亞力山大細(xì)胞,PLC/PRF/5細(xì)胞 PLC/PRF/5
// KL1470 肝癌細(xì)胞,SMMC-7721細(xì)胞 SMMC-7721
// KL1471 肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞 RH-35
// KL1472 肝癌細(xì)胞,QGY-7703細(xì)胞 QGY-7703
// KL1473 肝癌細(xì)胞,QGY-7701細(xì)胞 QGY-7701
CRL-1830 KL1474 肝癌細(xì)胞,Hepa 1-6細(xì)胞 Hepa 1-6
HB-8065 KL1475 肝癌細(xì)胞,Hep G2細(xì)胞 Hep G2
HB-8064 KL1476 肝癌細(xì)胞,Hep 3B2.1-7細(xì)胞 Hep 3B2.1-7
// KL1477 肝癌細(xì)胞,HCCLM3細(xì)胞 HCCLM3
// KL1478 肝癌細(xì)胞,CBRH-7919細(xì)胞 CBRH-7919
// KL1479 肝癌細(xì)胞,BEL-7405細(xì)胞 BEL-7405
// KL1480 肝癌細(xì)胞,BEL-7404細(xì)胞 BEL-7404
// KL1481 肝癌細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞 BEL-7402
TC-jcyj0067 KL1482 干酪乳桿菌干酪亞種
KL1483 干酷乳桿菌 ACCC 10639
// KL1484 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIC3細(xì)胞 SAC-IIC3
// KL1485 腹水瘤細(xì)胞,SAC-IIB2細(xì)胞 SAC-IIB2
CCL-8 KL1486 腹水瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 S-180
TC-jcyj0043 KL1487 副溶血性弧菌
CASC178 KL1488 負(fù)鼠腎細(xì)胞,OK細(xì)胞, OK
OK KL1489 負(fù)鼠腎細(xì)胞,
CRL-1840 KL1490 負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞
KL1491 腐敗希瓦氏菌 NCIMB12202
KL1492 福氏志賀氏菌 CMCC 51572
KL1493 浮游球衣菌 NBRC13543
KL1494 弗氏檸檬酸桿菌 CICC 20211
KL1495 弗氏鏈霉菌 ACCC 40012
