產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101388 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | LT04 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
LT04小鼠胚胎干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
LT04小鼠胚胎干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
LT04小鼠胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
LT04小鼠胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
菌株 KL1428 和元菌種與細(xì)胞
KL1429 漢遜德巴利酵母 ACCC 20010
KL1430 海棗曲霉 ACCC 30164
KL1431 哈茨木霉 ACCC 30371
Hed68 KL1432 果子貍腎上皮細(xì)胞,Hed68細(xì)胞
RTG KL1433 鮭魚胚胎細(xì)胞,RTG細(xì)胞
CHSE KL1434 鮭魚胚胎細(xì)胞,CHSE細(xì)胞
TC-jcyj0129 KL1435 光滑念珠菌
TC-jcyj0096 KL1436 光孢短柄帚霉
JRDC038 KL1437 骨髓瘤細(xì)胞株 U266細(xì)胞, U266
// KL1438 骨髓瘤細(xì)胞,SP2/0細(xì)胞 SP2/0
TIB-9 KL1439 骨髓瘤細(xì)胞,P3X63Ag8細(xì)胞 P3X63Ag8
CRL-1580 KL1440 骨髓瘤細(xì)胞,P3X63Ag8.653細(xì)胞 P3X63Ag8.653
TIB-18 KL1441 骨髓瘤細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]
CRL-1646 KL1442 骨髓瘤細(xì)胞,FO細(xì)胞 FO
HTB-96 KL1443 骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 U-2 OS
HTB-94 KL1444 骨肉瘤細(xì)胞,SW1353細(xì)胞 SW1353
CRL-1427 KL1445 骨肉瘤細(xì)胞,MG-63細(xì)胞 MG-63
KL1446 谷氨酸棒桿菌 ACCC 16522
TC-jcyj0047 KL1447 構(gòu)巢曲霉 ATCC 24919
MDCK superdome KL1448 狗腎細(xì)胞隆突型 MDCK superdome細(xì)胞
Super Tube KL1449 狗腎細(xì)胞,Super Tube細(xì)胞
LGZC194 KL1450 狗腎細(xì)胞,MDCK細(xì)胞, MDCK
MDCK(NBL-2) KL1451 狗腎細(xì)胞,MDCK(NBL-2)細(xì)胞
CCL-34 KL1452 狗腎細(xì)胞,MDCK (NBL-2)細(xì)胞 MDCK (NBL-2)
MDCK-EGFP-puro KL1453 狗腎上皮細(xì)胞,MDCK-EGFP-puro細(xì)胞
CASC073 KL1454 狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞,DH82細(xì)胞, DH82
KL1455 狗垂體細(xì)胞
// KL1456 宮頸癌細(xì)胞,HeLa細(xì)胞 HeLa
CCL-2.1 KL1457 宮頸癌細(xì)胞,HeLa 229)細(xì)胞 HeLa 229)
HCE1 KL1458 宮頸癌細(xì)胞,HCE1細(xì)胞
KL1459 根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌) ATCC11325
KL1460 睪丸酮叢毛單胞菌 NBRC14951
CRL-2065 KL1461 睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞 MLTC-1
JRDC124 KL1462 高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞,MHCC97-H細(xì)胞, MHCC97-H