產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC101389 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | G1 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
G1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌?,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL1395 黃直絲鏈霉菌 ACCC 40046
KL1396 黃色短桿菌 ACCC 11063
KL1397 黃曲霉 ATCC28539
TC-jcyj0049 KL1398 黃綠青霉
KL1399 黃綠綠僵菌 ACCC 30199、NRRL 20422
TC-jcyj0028 KL1400 黃桿菌屬 ATCC 21047
TC-jcyj0038 KL1401 環(huán)狀芽孢桿菌
TMNE KL1402 化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞,TMNE細(xì)胞
TC-jcyj0114 KL1403 化膿性鏈球菌 ATCC 19615
KL1404 厚孢根霉 ACCC 30302
VERO E6 KL1405 猴腎細(xì)胞系 VERO E6細(xì)胞
MA-104 KL1406 猴腎細(xì)胞系 MA-104細(xì)胞
BSC-1 KL1407 猴腎細(xì)胞系 BSC-1細(xì)胞
Marc145 KL1408 猴腎細(xì)胞,Marc145細(xì)胞
M145 KL1409 猴腎C M145細(xì)胞
marc-145-EGFP-puro KL1410 猴胚胎腎上皮細(xì)胞,marc-145-EGFP-puro細(xì)胞
RF/6A KL1411 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞,RF/6A細(xì)胞
CRL-1780 KL1412 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞, RF/6A細(xì)胞 RF/6A
MSCS KL1413 猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCS細(xì)胞
CCL-23 KL1414 喉表皮樣癌細(xì)胞,HEp-2細(xì)胞 HEp-2
KL1415 紅曲霉 ACCC 30342
KL1416 紅平紅球菌 ACCC 10543
CCL-137 KL1417 紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞,HEL299細(xì)胞 HEL299
CRL-1598 KL1418 橫紋肌瘤細(xì)胞,A-673細(xì)胞 A-673
MA-104 KL1419 恒河猴腎細(xì)胞,MA-104細(xì)胞
LLC-MK2 KL1420 恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞
CCL-7 KL1421 恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞 LLC-MK2
FRhK-4 KL1422 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞
CRL-1688 KL1423 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞 FRhK-4
CRL-6322 KL1424 黑色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞 B16
TC-jcyj0030 KL1425 黑曲霉 ATCC 16404
LGZC215 KL1426 褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞,RIN-m細(xì)胞, RIN-m
KL1427 褐球固氮菌 ACCC 10096