產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101413 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | CHBS2 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
CHBS2中華菊頭蝠皮膚細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
CHBS2中華菊頭蝠皮膚細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
CHBS2中華菊頭蝠皮膚細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
CHBS2中華菊頭蝠皮膚細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
95-D KL1008 人高轉(zhuǎn)移肺癌 95-D細(xì)胞
THC-8307 KL1009 人高分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞系 THC-8307細(xì)胞
HuH7-HCV KL1010 人感染HCV肝癌細(xì)胞,HuH7-HCV細(xì)胞
JRDC071 KL1011 人肝轉(zhuǎn)移癌 HCCLMS細(xì)胞, HCCLMS
THLE-3 KL1012 人肝永生化細(xì)胞,THLE-3細(xì)胞
LX-2 KL1013 人肝星形細(xì)胞正常 LX-2細(xì)胞
LX-2 KL1014 人肝星形細(xì)胞,LX-2細(xì)胞
HL-7702 KL1015 人肝細(xì)胞正常 HL-7702細(xì)胞
QSG-7701 KL1016 人肝細(xì)胞,QSG-7701細(xì)胞
FL62891 KL1017 人肝細(xì)胞,FL62891細(xì)胞
HIBEpiC KL1018 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞,HIBEpiC細(xì)胞
CASC111 KL1019 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞,HuH-6細(xì)胞, HuH-6
ED-25 KL1020 人肝靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,ED-25細(xì)胞
CASC204 KL1021 人肝膽管癌細(xì)胞,RBE細(xì)胞, RBE
PLC/PRF/5 KL1022 人肝癌亞歷山大細(xì)胞,PLC/PRF/5細(xì)胞
HCCC-9810 KL1023 人肝癌亞力山大細(xì)胞,HCCC-9810細(xì)胞
MHCC-97H KL1024 人肝癌細(xì)胞系MHCC-97H細(xì)胞
LM-6 KL1025 人肝癌細(xì)胞系 LM-6細(xì)胞
Human bel7402 KL1026 人肝癌細(xì)胞系 Human bel7402細(xì)胞
Hep-3B KL1027 人肝癌細(xì)胞系 Hep-3B細(xì)胞
MHCC-97L KL1028 人肝癌細(xì)胞MHCC-97L細(xì)胞
SNU-739 KL1029 人肝癌細(xì)胞,SNU-739細(xì)胞
SNU-475 KL1030 人肝癌細(xì)胞,SNU-475細(xì)胞
SNU-449 KL1031 人肝癌細(xì)胞,SNU-449細(xì)胞
SNU-398 KL1032 人肝癌細(xì)胞,SNU-398細(xì)胞
SMMC-7721 KL1033 人肝癌細(xì)胞,SMMC-7721細(xì)胞
SK-HEP-1 KL1034 人肝癌細(xì)胞,SK-HEP-1細(xì)胞
QGY-7703 KL1035 人肝癌細(xì)胞,QGY-7703細(xì)胞
QGy-7701 KL1036 人肝癌細(xì)胞,QGy-7701細(xì)胞
Li-7 KL1037 人肝癌細(xì)胞,Li-7細(xì)胞