產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101427 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | SEPfk |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
SEPfk小耳豬腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
SEPfk小耳豬腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
SEPfk小耳豬腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
SEPfk小耳豬腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
U-87MG KL0784 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,U-87MG細(xì)胞
U-87MG-EGFP KL0785 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP細(xì)胞
U-118 MG KL0786 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG細(xì)胞
JRDC082 KL0787 人腦星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞,U251細(xì)胞, U251
H4 KL0788 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(H4) H4細(xì)胞
U-373MG-EGFP KL0789 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,U-373MG-EGFP細(xì)胞
SF767 KL0790 人腦瘤細(xì)胞,SF767細(xì)胞
SF17 KL0791 人腦瘤細(xì)胞,SF17細(xì)胞
SF126 KL0792 人腦瘤細(xì)胞,SF126細(xì)胞
HEB KL0793 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株(正常)HEB細(xì)胞
HEB KL0794 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株 HEB細(xì)胞
TG-905 KL0795 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,TG-905細(xì)胞
SW038-C2 KL0796 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,SW038-C2細(xì)胞
U373 KL0797 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U373細(xì)胞
BT-325 KL0798 人腦多形性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,BT-325細(xì)胞
HS68 KL0799 人男性正常龜頭細(xì)胞系 HS68細(xì)胞
SGC-7901/VCR KL0800 人耐VCR胃腺癌細(xì)胞,SGC-7901/VCR細(xì)胞
MeT-5A KL0801 人膜間皮細(xì)胞,MeT-5A細(xì)胞
JRDC116 KL0802 人膜間皮細(xì)胞,CRL-9444細(xì)胞, CRL-9444
CRL-9444 MeT-5A KL0803 人膜間皮細(xì)胞,CRL-9444 MeT-5A細(xì)胞
Pfeiffer KL0804 人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞,Pfeiffer細(xì)胞
CASC091 KL0805 人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)Hce-8693細(xì)胞, Hce-8693
CRIC049 KL0806 人盲腸未分化癌 HCE-8962細(xì)胞, HCE-8962
JRDC034 KL0807 人慢性髓原白血病細(xì)胞,K562細(xì)胞, K562
K562 KL0808 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系 K562細(xì)胞
HCPEpiC KL0809 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞,HCPEpiC細(xì)胞
\ KL0810 人卵巢腺癌細(xì)胞
ES-2 KL0811 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞,ES-2細(xì)胞
PA-1 KL0812 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞,PA-1細(xì)胞