產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101428 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | MDBK |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
MDBK牛腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
MDBK牛腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
MDBK牛腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
MDBK牛腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
2V6.11 KL0754 人胚腎細(xì)胞,2V6.11細(xì)胞
293 KL0755 人胚腎細(xì)胞,293細(xì)胞
293XL-hTLR9 KL0756 人胚腎細(xì)胞,293XL-hTLR9細(xì)胞
293TN KL0757 人胚腎細(xì)胞,293TN細(xì)胞
293-mTLR5 KL0758 人胚腎細(xì)胞,293-mTLR5細(xì)胞
293-L.P. KL0759 人胚腎細(xì)胞,293-L.P.細(xì)胞
293FT KL0760 人胚腎細(xì)胞,293FT細(xì)胞
293ebna KL0761 人胚腎細(xì)胞,293ebna細(xì)胞
293A KL0762 人胚腎細(xì)胞,293A細(xì)胞
293 Cells, low passage KL0763 人胚腎細(xì)胞,293 Cells, low passage細(xì)胞
293 [HEK-293] KL0764 人胚腎細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞
HKC KL0765 人胚腎上皮細(xì)胞,HKC細(xì)胞
HK-2C KL0766 人胚腎上皮細(xì)胞,HK-2C細(xì)胞
GP2-293 KL0767 人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293細(xì)胞
GP2-293Luc KL0768 人胚腎上皮包裝細(xì)胞,GP2-293Luc細(xì)胞
CCC-HEK-1 KL0769 人胚腎二倍體細(xì)胞,CCC-HEK-1細(xì)胞
QSG-7701 KL0770 人胚肝細(xì)胞正常 QSG-7701細(xì)胞
CCC-HEL-1 KL0771 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞
WI-38 KL0772 人胚肺細(xì)胞,WI-38細(xì)胞
JRDC045 KL0773 人胚肺細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞, MRC-5
HLF-02 KL0774 人胚肺二倍體細(xì)胞,HLF-02細(xì)胞
Z-HL16C KL0775 人胚肺成纖維細(xì)胞突變癌細(xì)胞,Z-HL16C細(xì)胞
WI-38 KL0776 人胚肺成纖維細(xì)胞,WI-38細(xì)胞
MRC-5 KL0777 人胚肺成纖維細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞
MRC-5-EGFP+puro KL0778 人胚肺成纖維細(xì)胞,MRC-5-EGFP+puro細(xì)胞
HLF KL0779 人胚肺成纖維細(xì)胞,HLF細(xì)胞
HFL-I KL0780 人胚肺成纖維細(xì)胞,HFL-I細(xì)胞
HFL1 KL0781 人胚肺成纖維細(xì)胞,HFL1細(xì)胞
HELF KL0782 人胚肺成纖維細(xì)胞,HELF細(xì)胞
CCC-HPF-1 KL0783 人胚肺成纖維細(xì)胞,CCC-HPF-1細(xì)胞