產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC101431 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | BHK-21 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
BHK-21倉鼠腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
BHK-21倉鼠腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
BHK-21倉鼠腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
BHK-21倉鼠腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
CASC117 KL0694 人絨毛膜癌細(xì)胞,JEG-3細(xì)胞, JEG-3
JEG-3/VP16 KL0695 人絨癌細(xì)胞耐藥株 JEG-3/VP16細(xì)胞
JRDC133 KL0696 人絨癌細(xì)胞,JEG細(xì)胞, JEG
JEG-3 KL0697 人絨癌細(xì)胞,JEG-3細(xì)胞
AAV-293 KL0698 人人胚腎細(xì)胞,AAV-293細(xì)胞
M619 KL0699 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞,M619細(xì)胞
JRDC063 KL0700 人前列腺正常細(xì)胞,rwpe2細(xì)胞, rwpe2
RWPE1 KL0701 人前列腺上皮細(xì)胞,RWPE1細(xì)胞
PC-3M 2B4 KL0702 人前列腺癌細(xì)胞高轉(zhuǎn)移亞系 PC-3M 2B4細(xì)胞
VLcop KL0703 人前列腺癌細(xì)胞,VLcop細(xì)胞
UI-1 KL0704 人前列腺癌細(xì)胞,UI-1細(xì)胞
PC-3 KL0705 人前列腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞
LNCaP KL0706 人前列腺癌細(xì)胞,LNCaP細(xì)胞
Lncap KL0707 人前列腺癌細(xì)胞,Lncap細(xì)胞
LNCAP KL0708 人前列腺癌細(xì)胞,LNCAP細(xì)胞
LNCaP clone FGC KL0709 人前列腺癌細(xì)胞,LNCaP clone FGC細(xì)胞
JCA-1 KL0710 人前列腺癌細(xì)胞,JCA-1細(xì)胞
Human PC-3 KL0711 人前列腺癌細(xì)胞,Human PC-3細(xì)胞
Human Dul45 KL0712 人前列腺癌細(xì)胞,Human Dul45細(xì)胞
gpc-1 KL0713 人前列腺癌細(xì)胞,gpc-1細(xì)胞
DU-145 KL0714 人前列腺癌細(xì)胞,DU-145細(xì)胞
ALVA KL0715 人前列腺癌細(xì)胞,ALVA細(xì)胞
9L-E KL0716 人前列腺癌細(xì)胞,9L-E細(xì)胞
9L-B KL0717 人前列腺癌細(xì)胞,9L-B細(xì)胞
CASC001 KL0718 人前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞, 22RV1
pc-3 KL0719 人前列腺癌 pc-3細(xì)胞
CRIC065 KL0720 人前列腺癌 PC-13細(xì)胞, PC-13
DU145 KL0721 人前列腺癌 DU145細(xì)胞
JRDC066 KL0722 人前列腺 PC-3細(xì)胞, PC-3
CRIC087 KL0723 人臍靜脈血管內(nèi)皮原代細(xì)胞,HUVEC細(xì)胞, HUVEC