產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101437 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | MMK3 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
MMK3恒河猴腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
MMK3恒河猴腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
MMK3恒河猴腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
MMK3恒河猴腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
kyse-140 KL0569 人食管癌細(xì)胞,kyse-140細(xì)胞
Eca-109 KL0570 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞
EC9706 KL0571 人食管癌細(xì)胞,EC9706細(xì)胞
EC871214 KL0572 人食管癌細(xì)胞,EC871214細(xì)胞
EC18 KL0573 人食管癌細(xì)胞,EC18細(xì)胞
CaES-17 KL0574 人食管癌細(xì)胞,CaES-17細(xì)胞
LGZC006 KL0575 人食道上皮細(xì)胞,HEEC細(xì)胞, HEEC
HuTu-80 KL0576 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞
HMC KL0577 人腎小球系膜細(xì)胞,HMC細(xì)胞
HBZY-1 KL0578 人腎小球髓母細(xì)胞,HBZY-1細(xì)胞
HK-2 KL0579 人腎小管上皮細(xì)胞系 HK-2細(xì)胞
JRDC002 KL0580 人腎小管上皮細(xì)胞,HK-2細(xì)胞, HK-2
HK2 KL0581 人腎小管上皮細(xì)胞,HK2細(xì)胞
HK-2 KL0582 人腎小管近段上皮細(xì)胞,HK-2細(xì)胞
ACHN KL0583 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞,ACHN細(xì)胞
CASC013 KL0584 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞,769-P細(xì)胞, 769-P
786-O KL0585 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞,786-O細(xì)胞
Caki-2 KL0586 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,Caki-2細(xì)胞
ACHN KL0587 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,ACHN細(xì)胞
Caki-1 KL0588 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞,Caki-1細(xì)胞
Caki-1 KL0589 人腎透明細(xì)胞癌 Caki-1細(xì)胞
NCI-H205 KL0590 人腎上腺腺瘤細(xì)胞,NCI-H205細(xì)胞
CASC123 KL0591 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移) KP-N-NS細(xì)胞, KP-N-NS
SW-13 KL0592 人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞,SW-13細(xì)胞
NCI-H295R KL0593 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞,NCI-H295R細(xì)胞
GES KL0594 人腎上皮細(xì)胞,GES細(xì)胞
SKRC39 KL0595 人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞,SKRC39細(xì)胞
HK-2 KL0596 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞,HK-2細(xì)胞
CASC228 KL0597 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞,SK-NEP-1細(xì)胞, SK-NEP-1
769-P KL0598 人腎癌細(xì)胞系(769-P) 769-P細(xì)胞
ACHN KL0599 人腎癌細(xì)胞系 ACHN細(xì)胞