產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101445 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | CHO |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
BEAS-2B KL0440 人支氣管上皮細(xì)胞,BEAS-2B細(xì)胞
JRDC114 KL0441 人支氣管上皮細(xì)胞,16HBE細(xì)胞, 16HBE
MDA-kb2 KL0442 人正常乳腺細(xì)胞,MDA-kb2細(xì)胞
LGZC014 KL0443 人正常乳腺上皮細(xì)胞,MCF-10A細(xì)胞, MCF-10A
human MCF10A KL0444 人正常乳腺上皮細(xì)胞,human MCF10A細(xì)胞
RWPE-2 KL0445 人正常前列腺上皮細(xì)胞,RWPE-2細(xì)胞
RWPE-1 KL0446 人正常前列腺上皮細(xì)胞,RWPE-1細(xì)胞
WPMY-1 KL0447 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞,WPMY-1細(xì)胞
JRDC049 KL0448 人正常皮膚細(xì)胞,Hacat細(xì)胞, Hacat
LGZC005 KL0449 人正常肝細(xì)胞,LO2細(xì)胞, LO2
human QSG-7701 KL0450 人正常肝細(xì)胞,human QSG-7701細(xì)胞
human L02 KL0451 人正常肝細(xì)胞,human L02細(xì)胞
HL-7702 KL0452 人正常肝細(xì)胞,HL-7702細(xì)胞
HBL-100 KL0453 人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞,HBL-100細(xì)胞
LGZC004 KL0454 人張氏肝細(xì)胞,Chang liver細(xì)胞, Chang liver
JRDC009 KL0455 人原位*腺癌細(xì)胞,BxPC-3細(xì)胞, BxPC-3
BxPc-3-EGFP-puro KL0456 人原位*腺癌細(xì)胞,BxPc-3-EGFP-puro細(xì)胞
HL-60 KL0457 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞,HL-60細(xì)胞
AL7P/HL-60R KL0458 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞,AL7P/HL-60R細(xì)胞
293 Ad5+ KL0459 人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 293 Ad5+細(xì)胞
UT-7 KL0460 人原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞,UT-7細(xì)胞
HaCaT KL0461 人永生化表皮細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞
LGZC011 KL0462 人永生化鼻咽上皮細(xì)胞系 NP69細(xì)胞, NP69
HPAC KL0463 人*腺泡上皮癌 HPAC細(xì)胞
Panc 10.05 KL0464 人*腺癌細(xì)胞,Panc 10.05細(xì)胞
AR42J KL0465 人*細(xì)胞,AR42J細(xì)胞
PL45 KL0466 人*導(dǎo)管腺癌細(xì)胞,PL45細(xì)胞
SW 1990 KL0467 人*癌細(xì)胞系 SW 1990細(xì)胞
SFPAC-1 KL0468 人*癌細(xì)胞,SFPAC-1細(xì)胞
PSN1 KL0469 人*癌細(xì)胞,PSN1細(xì)胞
PC-3 KL0470 人*癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞
PC-2 KL0471 人*癌細(xì)胞,PC-2細(xì)胞
Patu 8988 KL0472 人*癌細(xì)胞,Patu 8988細(xì)胞
PANC-1 KL0473 人*癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞