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上海康朗生物科技有限公司
DG-K1山羊腎上皮樣細胞
  • 品牌:KALANG/進口品牌
  • 產(chǎn)地:中國/美國
  • 貨號:kl-CC101739
  • 發(fā)布日期: 2016-03-18
  • 更新日期: 2024-12-20
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 中國/美國
品牌 KALANG/進口品牌
貨號 kl-CC101739
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 DG-K1
保質(zhì)期 12個月個月

DG-K1山羊腎上皮樣細胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細胞生長:貼壁生長

細胞形態(tài):上皮樣;多角形

細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

DG-K1山羊腎上皮樣細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止

離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。

DG-K1山羊腎上皮樣細胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);

2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

DG-K1山羊腎上皮樣細胞復(fù)蘇注意事項如下:

A.復(fù)蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。

B. 細胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行實驗。

C. 細胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復(fù)。

D.細胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

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