產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101742 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | WB-S2 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
WB-S2水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
WB-S2水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
WB-S2水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
WB-S2水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
145-2C11 KL1690 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞,145-2C11細(xì)胞
Pr-HNV8 KL1691 菜青蟲(chóng)卵巢細(xì)胞,Pr-HNV8細(xì)胞
KL1692 丙酮丁醇梭菌(丙酮丁醇桿菌) CICC 8011
TC-jcyj0016 KL1693 表皮葡萄球菌 ATCC 12228
CRL-1555 KL1694 表皮癌細(xì)胞,A-431細(xì)胞 A-431
293FT KL1695 表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞,293FT細(xì)胞
293ET KL1696 表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞,293ET細(xì)胞
HepG2.2.15 KL1697 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞,HepG2.2.15細(xì)胞
TC-jcyj0160 KL1698 變異鏈球菌
KL1699 變形桿菌 ACCC 11002
Tb 1 Lu KL1700 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞
SUNE-1亞株-5-8F KL1701 鼻咽癌細(xì)胞系 SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞
// KL1702 鼻咽癌細(xì)胞,CNE細(xì)胞 CNE
CNE KL1703 鼻咽癌 CNE細(xì)胞
KL1704 貝酵母 CICC 1408
KL1705 保加利亞乳桿菌 ACCC 10638
HTB-4 KL1706 膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24細(xì)胞 T24
HTB-9 KL1707 膀胱癌細(xì)胞,5637細(xì)胞 5637
TC-jcyj0075 KL1708 阪崎腸桿菌
TC-jcyj0176 KL1709 敗毒梭菌Clostridium septicum ATCC 12464
CRL-2256 KL1710 白血病細(xì)胞,RBL-2H3細(xì)胞 RBL-2H3
CCL-219 KL1711 白血病細(xì)胞,L1210細(xì)胞 L1210
CCL-246 KL1712 白血病細(xì)胞,KG-1細(xì)胞 KG-1
KL1713 白色噬瓊膠菌 NBRC102603
KL1714 白色葡萄球菌 ATCC8799
KL1715 白色念珠菌 CMCC(F) 98001
TC-jcyj0011 KL1716 白色假絲酵母/白色念球菌 ATCC 10231
KL1717 白色假絲酵母 CMCC 98001
KL1718 白球擬酵母 CICC 1040
KL1719 白淺灰鏈霉菌 ACCC 40001
SCF KL1720 白鰱尾鰭細(xì)胞,SCF細(xì)胞
JEG-3/VP16-IL-2 KL1721 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞
KL1722 白僵菌 ACCC 30006