產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101743 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | WB-S3 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
WB-S3水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
WB-S3水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
WB-S3水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
WB-S3水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
TC-jcyj0056 KL1655 串珠鐮刀菌
KL1656 串珠鐮孢 ATCC52539
TC-jcyj0092 KL1657 出芽短梗霉
TC-jcyj0074 KL1658 出血性大腸埃希氏菌
KL1659 臭曲霉 ACCC 30126
TC-jcyj0167 KL1660 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌 ATCC 43055
CRL-9078 KL1661 成纖維細(xì)胞,PA317細(xì)胞 PA317
CCL-1 KL1662 成纖維細(xì)胞,L929細(xì)胞 L929
HTB-85 KL1663 成骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 Saos-2
KL1664 潮濕纖維單胞菌 ATCC491
KL1665 腸炎沙門(mén)氏菌腸炎亞種 ATCC14028
TC-jcyj0040 KL1666 腸炎沙門(mén)氏菌
KL1667 腸埃希氏菌 CMCC(B) 44103
TC-jcyj0063 KL1668 長(zhǎng)雙歧桿菌
KL1669 長(zhǎng)根菇(長(zhǎng)根奧德磨) ACCC 50053
MLA-144 KL1670 長(zhǎng)臂猿淋巴瘤 MLA-144細(xì)胞
CCL-35 KL1671 長(zhǎng)鼻袋鼠腎細(xì)胞,Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞 Pt K1 (NBL-3)
KL1672 產(chǎn)朊假絲酵母 ATCC22023
TC-jcyj0084 KL1673 產(chǎn)氣莢膜梭菌 ATCC 13124
TC-jcyj0147 KL1674 產(chǎn)氣腸桿菌
KL1675 產(chǎn)黃纖維單胞菌 ACCC 11055
B95-8 KL1676 產(chǎn)EBV的絨猴白細(xì)胞,B95-8細(xì)胞
CIK KL1677 草魚(yú)*細(xì)胞,CIK細(xì)胞
L8824 KL1678 草魚(yú)*細(xì)胞,L8824細(xì)胞
BHK-21 KL1679 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞,BHK-21細(xì)胞
CASC037 KL1680 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞,BHK-21 [C-13]細(xì)胞, BHK-21 [C-13]
CASC061 KL1681 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1細(xì)胞, CHO-K1
CHO-K1-EGFP KL1682 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP細(xì)胞
CASC060 KL1683 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr細(xì)胞, CHO/dhFr
CHO/dhFr- KL1684 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr-細(xì)胞
CASC130 KL1685 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,Lec1細(xì)胞, Lec1
CHO KL1686 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CHO細(xì)胞
V79 KL1687 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,V79細(xì)胞
R1610 KL1688 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,R1610細(xì)胞
CHL KL1689 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞