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HumanCellline1D3荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國/美國
  • 貨號(hào):kl-CC101823
  • 發(fā)布日期: 2016-03-18
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 中國/美國
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號(hào) kl-CC101823
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 HumanCellline1D3
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

HumanCellline1D3荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

HumanCellline1D3荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。

HumanCellline1D3荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

HumanCellline1D3荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

TIB-181 KL1317 淋巴瘤細(xì)胞,EL4. IL-2細(xì)胞 EL4. IL-2

KL1318 裂殖壺菌 ATCC20888

KL1319 亮白曲霉 CICC 2360

TC-jcyj0061 KL1320 兩歧雙歧桿菌 ATCC 29521

TC-jcyj0145 KL1321 痢疾志賀氏菌

KL1322 蠣灰鏈霉菌 ATCC27455

KL1323 鯉魚尾鰭細(xì)胞

KL1324 里氏木霉 ATCC24449

KL1325 酪丁酸梭菌 ATCC25755

TC-jcyj0037 KL1326 蠟樣芽孢桿菌

KL1327 蠟蚧輪枝孢菌 ACCC 32146

KL1328 昆明鏈霉菌 ATCC35682

SF-9 KL1329 昆蟲細(xì)胞系 SF-9細(xì)胞

Sf-21 KL1330 昆蟲細(xì)胞系 Sf-21細(xì)胞

KL1331 寬圓羊肚菌 ACCC 50759

KL1332 枯草芽孢桿菌黑色變種 ATCC 9372

TC-jcyj0099 KL1333 枯草芽孢桿菌 ATCC 6633

KL1334 扣囊內(nèi)孢霉 ATCC36213

HN13 KL1335 口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞,HN13細(xì)胞

CCL-17 KL1336 口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 KB

KL1337 孔雀石綠鏈霉菌 ACCC 40026

TC-jcyj0044 KL1338 空腸彎曲菌 ATCC 33291

TC-jcyj0172 KL1339 空腸彎曲桿菌 ATCC 33291

TC-jcyj0132 KL1340 克柔念珠菌 ATCC 6258

KL1341 克柔假絲酵母菌 ATCC 14243

TC-jcyj0146 KL1342 克雷伯肺炎桿菌

KL1343 抗生鏈霉菌 NRRL3238

KL1344 抗輻射鏈霉菌 DSMZ41901

KL1345 康寧木霉 CICC 13012

KL1346 卡爾斯伯酵母 ACCC 20166

// KL1347 巨噬細(xì)胞,Ana-1細(xì)胞 Ana-1

KL1348 巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,Dami細(xì)胞 Dami

KL1349 巨大芽孢桿菌 ACCC 11011

TC-jcyj0033 KL1350 桔青霉

 


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