產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC101838 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | K562-Wnt5a |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
K562-Wnt5a人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
K562-Wnt5a人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
K562-Wnt5a人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
K562-Wnt5a人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL1281 莫格球擬酵母 CICC 1709
KL1282 滅酵母 ACCC 20200
KL1283 米曲霉 ACCC 303163
KL1284 玫瑰褐鏈霉菌 ACCC 40123
TC-jcyj0035 KL1285 毛霉
F81 KL1286 貓腎細(xì)胞,F81細(xì)胞
CASC066 KL1287 貓腎細(xì)胞,CRFK細(xì)胞, CRFK
// KL1288 盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) Hce-8693細(xì)胞 Hce-8693
CCL-243 KL1289 慢性髓原白血病細(xì)胞,K-562細(xì)胞 K-562
KL1290 馬克斯克魯維酵母 ATCC36534
MDCK (NBL-2) KL1291 馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞系 MDCK (NBL-2)細(xì)胞
TC-jcyj0070 KL1292 羅伊氏乳桿菌
MA104 KL1293 羅猴胎腎細(xì)胞,MA104細(xì)胞
CRL-1735 KL1294 卵巢細(xì)胞,Lec1細(xì)胞 Lec1
CRL-1978 KL1295 卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞,ES-2細(xì)胞 ES-2
HTB-77 KL1296 卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞 SK-OV-3
HTB-161 KL1297 卵巢癌細(xì)胞,NIH:OVCAR-3細(xì)胞 NIH:OVCAR-3
HO8910 KL1298 卵巢癌 HO8910細(xì)胞
KL1299 綠針假單胞菌 ATCC13985
U14-GFP KL1300 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞,U14-GFP細(xì)胞
MFC-GFP KL1301 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞,MFC-GFP細(xì)胞
MGC803-GFP KL1302 綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞,MGC803-GFP細(xì)胞
TC-jcyj0097 KL1303 綠色木霉
KL1304 綠膿假單胞菌(綠膿桿菌) CMCC10104
Vero KL1305 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞
RF/6A KL1306 綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞,RF/6A細(xì)胞
LLC-MK2 KL1307 綠猴恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞
KL1308 魯氏接合酵母 CICC 1379
TC-jcyj0125 KL1309 流感嗜血桿菌 ATCC 49247
KL1310 鱗癌VX-2(兔模型)
TC-jcyj0128 KL1311 淋病柰瑟氏菌 ATCC 49226
CRL-2570 KL1312 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,A3細(xì)胞 A3
TIB-160 KL1313 淋巴瘤細(xì)胞,YAC-1細(xì)胞 YAC-1
Raji人Burkitt's KL1314 淋巴瘤細(xì)胞,Raji人Burkitt's細(xì)胞
CCL-46 KL1315 淋巴瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 P388D1
TIB-39 KL1316 淋巴瘤細(xì)胞,EL4細(xì)胞 EL4