產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC101839 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | S18(CNE-2clone18) |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
S18(CNE-2clone18)人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
S18(CNE-2clone18)人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
S18(CNE-2clone18)人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
S18(CNE-2clone18)人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
TC-jcyj0064 KL1246 青春雙歧桿菌 ATCC 15703
KL1247 淺灰鏈霉菌杭州變種 ACCC 40075
// KL1248 前列腺癌細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 RM-1
CRL-1435 KL1249 前列腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 PC-3
LncaP KL1250 前列腺癌細(xì)胞,LncaP細(xì)胞
CRL-1740 KL1251 前列腺癌細(xì)胞,Lncap細(xì)胞 Lncap
HTB-81 KL1252 前列腺癌細(xì)胞,DU145細(xì)胞 DU145
CRL-2505 KL1253 前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 22RV1
JRDC053 KL1254 前列腺癌 p69細(xì)胞, p69
TC-jcyj0149 KL1255 奇異變形桿菌
TC-jcyj0148 KL1256 普通變形桿菌
KL1257 葡萄芽假絲酵母 ACCC 20201
KL1258 葡萄孢 ACCC 30384
TC-jcyj0178 KL1259 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Clostridium tetani ATCC 19406
KL1260 平展米曲霉(米曲霉平展變種) CICC 2345
KL1261 平沙綠僵菌 ACCC 30105
TC-jcyj0166 KL1262 啤酒酵母 ATCC 9763
CRL-1811 KL1263 皮下結(jié)締組織細(xì)胞,A9細(xì)胞 A9
CRL-2122 KL1264 皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 CCD-1095Sk
CRL-1658 KL1265 胚胎成纖維細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞 NIH/3T3
CCL-92 KL1266 胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-Swiss albino細(xì)胞 3T3-Swiss albino
CCL-75 KL1267 胚肺細(xì)胞,WI-38細(xì)胞 WI-38
CCL-171 KL1268 胚肺細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞 MRC-5
// KL1269 胚肺成纖維細(xì)胞,HFL-I(MEMα)細(xì)胞 HFL-I(MEMα)
KL1270 泡盛曲霉 CICC 2253
KL1271 諾爾斯氏鏈霉菌 ACCC 40029
CASC145 KL1272 牛腎細(xì)胞,MDBK (NBL-1)細(xì)胞, MDBK (NBL-1)
CASC077 KL1273 牛胚氣管細(xì)胞,EBTr (NBL-4)細(xì)胞, EBTr (NBL-4)
KL1274 釀酒酵母 ATCC 26603
PA317 KL1275 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的鼠胚胎成纖維細(xì)胞,PA317細(xì)胞
CCL-131 KL1276 腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2A細(xì)胞 Neuro-2A
JRDC073 KL1277 腦膠質(zhì)瘤 SHG-44細(xì)胞, SHG-44
KL1278 耐放射異常球菌 ATCC13939
HCT-8/VCR KL1279 耐長(zhǎng)春新堿結(jié)腸癌細(xì)胞系 HCT-8/VCR細(xì)胞
A549/DDP KL1280 耐DDP肺癌細(xì)胞,A549/DDP細(xì)胞