產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC101853 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | pCSN2-HLZ |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
pCSN2-HLZ荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
pCSN2-HLZ荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
pCSN2-HLZ荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
pCSN2-HLZ荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
Hep3B2.1-7 KL1045 人肝癌細(xì)胞,Hep3B2.1-7細(xì)胞
Hep G2 KL1046 人肝癌細(xì)胞,Hep G2細(xì)胞
JRDC054 KL1047 人肝癌細(xì)胞,hep 3B細(xì)胞, hep 3B
Hep 3B2.1-7 KL1048 人肝癌細(xì)胞,Hep 3B2.1-7細(xì)胞
HCC-9724 KL1049 人肝癌細(xì)胞,HCC-9724細(xì)胞
H7402 KL1050 人肝癌細(xì)胞,H7402細(xì)胞
FL62891 KL1051 人肝癌細(xì)胞,FL62891細(xì)胞
Bel-7405 KL1052 人肝癌細(xì)胞,Bel-7405細(xì)胞
BEL-7402 KL1053 人肝癌細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞
97H-EGFP-puro KL1054 人肝癌細(xì)胞,97H-EGFP-puro細(xì)胞
9204 KL1055 人肝癌細(xì)胞,9204細(xì)胞
CRIC020 KL1056 人肝癌 QGY-Q3*細(xì)胞, QGY-Q3*
AMS2 KL1057 人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株 AMS2細(xì)胞
BB7.2 KL1058 人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞
NCI-H1650 KL1059 人肺支氣管癌細(xì)胞,NCI-H1650細(xì)胞
NCI-H2227 KL1060 人肺小細(xì)胞肺癌 NCI-H2227細(xì)胞
NCI-H596 KL1061 人肺腺鱗癌細(xì)胞,NCI-H596細(xì)胞
L78 KL1062 人肺腺鱗癌細(xì)胞,L78細(xì)胞
PG49 KL1063 人肺腺癌細(xì)胞系 PG49細(xì)胞
GLC-82-TK KL1064 人肺腺癌細(xì)胞(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞) GLC-82-TK細(xì)胞
Calu-3 KL1065 人肺腺癌細(xì)胞(胸膜滲出液)Calu-3細(xì)胞
SPC-A-1 KL1066 人肺腺癌細(xì)胞,SPC-A-1細(xì)胞
PC-9 KL1067 人肺腺癌細(xì)胞,PC-9細(xì)胞
PAa KL1068 人肺腺癌細(xì)胞,PAa細(xì)胞
NCI-H441 [H441] KL1069 人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H441 [H441]細(xì)胞
NCI-H292 KL1070 人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H292細(xì)胞
NCI-H1975 KL1071 人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1975細(xì)胞
CASC162 KL1072 人肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1395細(xì)胞, NCI-H1395
LTPEP-a-2 KL1073 人肺腺癌細(xì)胞,LTPEP-a-2細(xì)胞
Human H1299 KL1074 人肺腺癌細(xì)胞,Human H1299細(xì)胞
H1299 KL1075 人肺腺癌細(xì)胞,H1299細(xì)胞
GLC-82 KL1076 人肺腺癌細(xì)胞,GLC-82細(xì)胞
Calu-3 KL1077 人肺腺癌細(xì)胞,Calu-3細(xì)胞