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SDM昆蟲細(xì)胞完全培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣；多角形

細(xì)胞傳代：1:2-1:4傳代；每周2-3次

SDM昆蟲細(xì)胞凍存步驟：我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):

⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

⑵ 胰酶消化

⑶ 加培養(yǎng)基中止消化，有的細(xì)胞是加血清中止

⑷ 離心收集細(xì)胞，不同細(xì)胞離心率不一樣（以上僅為貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞收集就用第四部）

⑸ 吸出離心管上清液，加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞，移到凍存管，放4度半小時，-20 度兩小時，-70度過夜，再放液氮長期保存。

SDM昆蟲細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下：

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫，回溫后將其用75%酒精擦拭，移入無菌操作臺內(nèi)；

2 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套之后，從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入，需擰松凍存管，排出內(nèi)部殘留的液氮，之后擰緊凍存管，放入37-40℃水浴中，并不時搖動，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi)；

3 在1,000 rpm下離心5～10分鐘，棄去上清液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng)；

4 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高，及時傳代；否則，及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

SDM昆蟲細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下：

A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全，尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入，請一定要擰松凍存管，排出液氮，防止溫度升高時爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同，須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行實驗。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素（G418等），以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

LGZC132 KL0814 人卵巢癌細(xì)胞株 OC3細(xì)胞, OC3

Anglne KL0815 人卵巢癌細(xì)胞系 Anglne細(xì)胞

3AO KL0816 人卵巢癌細(xì)胞系 3AO細(xì)胞

SKOV3/DDP KL0817 人卵巢癌細(xì)胞（耐藥） SKOV3/DDP細(xì)胞

LGZC112 KL0818 人卵巢癌細(xì)胞,TOV-21G細(xì)胞, TOV-21G

TOV-112D KL0819 人卵巢癌細(xì)胞,TOV-112D細(xì)胞

SW626 KL0820 人卵巢癌細(xì)胞,SW626細(xì)胞

SK-OV-3 KL0821 人卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞

OVTOKO KL0822 人卵巢癌細(xì)胞,OVTOKO細(xì)胞

OVISE KL0823 人卵巢癌細(xì)胞,OVISE細(xì)胞

OVCAR4 KL0824 人卵巢癌細(xì)胞,OVCAR4細(xì)胞

OVCAR3 KL0825 人卵巢癌細(xì)胞,OVCAR3細(xì)胞

Ovary KL0826 人卵巢癌細(xì)胞,Ovary細(xì)胞

OVAC KL0827 人卵巢癌細(xì)胞,OVAC細(xì)胞

OV90 KL0828 人卵巢癌細(xì)胞,OV90細(xì)胞

OV56 KL0829 人卵巢癌細(xì)胞,OV56細(xì)胞

KURAMOCHI KL0830 人卵巢癌細(xì)胞,KURAMOCHI細(xì)胞

KM202L KL0831 人卵巢癌細(xì)胞,KM202L細(xì)胞

IGROV1 KL0832 人卵巢癌細(xì)胞,IGROV1細(xì)胞

HOC1 KL0833 人卵巢癌細(xì)胞,HOC1細(xì)胞

HO-8910 KL0834 人卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞

EFO-27 KL0835 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-27細(xì)胞

EFO-21 KL0836 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-21細(xì)胞

COV644 KL0837 人卵巢癌細(xì)胞,COV644細(xì)胞

COV504 KL0838 人卵巢癌細(xì)胞,COV504細(xì)胞

COV434 KL0839 人卵巢癌細(xì)胞,COV434細(xì)胞

COV362 KL0840 人卵巢癌細(xì)胞,COV362細(xì)胞

COLO720E KL0841 人卵巢癌細(xì)胞,COLO720E細(xì)胞

COLO-704 KL0842 人卵巢癌細(xì)胞,COLO-704細(xì)胞

COC1 KL0843 人卵巢癌細(xì)胞,COC1細(xì)胞

CaOV3 KL0844 人卵巢癌細(xì)胞,CaOV3細(xì)胞

A2780 KL0845 人卵巢癌細(xì)胞,A2780細(xì)胞

8910PM KL0846 人卵巢癌細(xì)胞,8910PM細(xì)胞

3AO KL0847 人卵巢癌細(xì)胞,3AO細(xì)胞