產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102006 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | M2-10B4 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
M2-10B4小鼠骨髓纖維原細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
M2-10B4小鼠骨髓纖維原細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
M2-10B4小鼠骨髓纖維原細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
M2-10B4小鼠骨髓纖維原細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
M,BE(2)-M17 KL0616 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,M,BE(2)-M17細(xì)胞
CASC114 KL0617 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,IMR-32細(xì)胞, IMR-32
BE(2)-M17 KL0618 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,BE(2)-M17細(xì)胞
U251 KL0619 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,U251細(xì)胞
BT-325 KL0620 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,BT-325細(xì)胞
SF-268 KL0621 人神經(jīng)癌細(xì)胞,SF-268細(xì)胞
TSCCA KL0622 人舌鱗癌細(xì)胞系 TSCCA細(xì)胞
TCA8113 KL0623 人舌鱗癌細(xì)胞,TCA8113細(xì)胞
Tca-8113-EGFP KL0624 人舌鱗癌細(xì)胞,Tca-8113-EGFP細(xì)胞
SCC-9 KL0625 人舌鱗癌細(xì)胞,SCC-9細(xì)胞
SCC-25 KL0626 人舌鱗癌細(xì)胞,SCC-25細(xì)胞
CAL-27 KL0627 人舌鱗癌細(xì)胞,CAL-27細(xì)胞
CAL 27-EGFP KL0628 人舌鱗癌細(xì)胞,CAL 27-EGFP細(xì)胞
CAL 27-EGFP-puro KL0629 人舌鱗癌細(xì)胞,CAL 27-EGFP-puro細(xì)胞
Tca8113-P60 KL0630 人舌癌細(xì)胞系 Tca8113-P60細(xì)胞
Tca-8113 KL0631 人舌癌細(xì)胞,Tca-8113細(xì)胞
T6 KL0632 人舌癌細(xì)胞,T6細(xì)胞
JRDC080 KL0633 人舌癌細(xì)胞,SCC-25細(xì)胞, SCC-25
HOPC-os KL0634 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長(zhǎng) HOPC-os細(xì)胞
SW 1353 KL0635 人軟骨肉瘤細(xì)胞,SW 1353細(xì)胞
SK-BR-3 KL0636 人乳腺腺癌細(xì)胞,SK-BR-3細(xì)胞
MDA-MB-436 KL0637 人乳腺腺癌細(xì)胞,MDA-MB-436細(xì)胞
CASC140 KL0638 人乳腺腺癌細(xì)胞,MDA-MB-415細(xì)胞, MDA-MB-415
MDA-MB-231 KL0639 人乳腺腺癌 MDA-MB-231細(xì)胞
HBL-100 KL0640 人乳腺細(xì)胞,HBL-100細(xì)胞
BT549 KL0641 人乳腺細(xì)胞,BT549細(xì)胞
CCD-1095Sk KL0642 人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞
T-47D KL0643 人乳腺管癌細(xì)胞,T-47D細(xì)胞
CASC042 KL0644 人乳腺管癌細(xì)胞,BT-549細(xì)胞, BT-549
UACC812 KL0645 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞,UACC812細(xì)胞
BT-474 KL0646 人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞,BT-474細(xì)胞