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HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性)
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國(guó)/美國(guó)
  • 貨號(hào):kl-CC102044
  • 發(fā)布日期: 2016-03-18
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 中國(guó)/美國(guó)
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號(hào) kl-CC102044
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱(chēng) HNPMEF(CF-1)
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性)完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性)凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性)復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

HNPMEF(CF-1)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性)復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類(lèi),若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

CASC187 KL0224 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3X63Ag8.653

SP2/MIL-6 KL0225 小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞,SP2/MIL-6細(xì)胞

P9 KL0226 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,P9細(xì)胞

P9-EGFP-puro KL0227 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,P9-EGFP-puro細(xì)胞

OP9 KL0228 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,OP9細(xì)胞

CASC121 KL0229 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞,K7M2-WT細(xì)胞, K7M2-WT

CASC151 KL0230 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞, MLTC-1

CASC250 KL0231 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞,TM3細(xì)胞, TM3

S-180 KL0232 小鼠肛門(mén)肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞

AML12 KL0233 小鼠肝細(xì)胞,AML12細(xì)胞

Hepa 1-6 KL0234 小鼠肝癌細(xì)胞,Hepa 1-6細(xì)胞

H22 KL0235 小鼠肝癌細(xì)胞,H22細(xì)胞

SAC-II C3 KL0236 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II C3細(xì)胞

SAC-II B2 KL0237 小鼠腹水瘤細(xì)胞,SAC-II B2細(xì)胞

JRDC070 KL0238 小鼠腹水瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞, S-180

LA795 KL0239 小鼠肺腺癌細(xì)胞系 LA795細(xì)胞

L929 KL0240 小鼠肺成纖維細(xì)胞,L929細(xì)胞

LLC KL0241 小鼠肺癌細(xì)胞,LLC細(xì)胞

LLC1[LL/2] KL0242 小鼠肺癌細(xì)胞,LLC1[LL/2]細(xì)胞

LGZC198 KL0243 小鼠肺癌細(xì)胞,Lewis細(xì)胞, Lewis

P815 KL0244 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞,P815細(xì)胞

JRDC079 KL0245 小鼠肥大細(xì)胞,P815細(xì)胞, P815

Raw-Blue KL0246 小鼠單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,Raw-Blue細(xì)胞

RAW264.7 KL0247 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞,RAW264.7細(xì)胞

J774A.1 KL0248 小鼠單核巨噬細(xì)胞,J774A.1細(xì)胞

CT-26.WT KL0249 小鼠大腸癌細(xì)胞,CT-26.WT細(xì)胞

MPC KL0250 小鼠垂體細(xì)胞,MPC細(xì)胞

AtT-20 KL0251 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素) AtT-20細(xì)胞

GT1-1 KL0252 小鼠垂體瘤細(xì)胞,GT1-1細(xì)胞

AtT-20 KL0253 小鼠垂體瘤細(xì)胞,AtT-20細(xì)胞

JRDC086 KL0254 小鼠垂體瘤 ATT-20細(xì)胞, ATT-20

 


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