產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102052 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | MDCK/IgR |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
MDCK/IgR犬腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
MDCK/IgR犬腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
MDCK/IgR犬腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
MDCK/IgR犬腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
CASC234 KL0134 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,SV40 MES13細(xì)胞, SV40 MES 13
MES-13 KL0135 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,MES-13細(xì)胞
CASC201 KL0136 小鼠腎腺癌細(xì)胞,RAG細(xì)胞, RAG
MC53 KL0137 小鼠腎系膜細(xì)胞,MC53細(xì)胞
CASC267 KL0138 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞,Y1細(xì)胞, Y1
M-1 KL0139 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化) M-1細(xì)胞
RuCa KL0140 小鼠腎癌細(xì)胞株 RuCa細(xì)胞
Kert-3 KL0141 小鼠腎癌細(xì)胞,Kert-3細(xì)胞
HB-12317 KL0142 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞,NG108-15 [ 108CC15 ]細(xì)胞 NG108-15 [ 108CC15 ]
NG108-15 KL0143 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞,NG108-15細(xì)胞
G422 KL0144 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,G422細(xì)胞
ATDC-5-EGFP KL0145 小鼠軟骨細(xì)胞,ATDC-5-EGFP細(xì)胞
CASC044 KL0146 小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞,C127細(xì)胞, C127
EMT-6 KL0147 小鼠乳腺癌細(xì)胞株 EMT-6細(xì)胞
MA891 KL0148 小鼠乳腺癌細(xì)胞,MA891細(xì)胞
CCC-Ca761-03 KL0149 小鼠乳腺癌細(xì)胞,CCC-Ca761-03細(xì)胞
4T1 KL0150 小鼠乳腺癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞
MA-891 KL0151 小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MA-891細(xì)胞
EMT6 KL0152 小鼠乳腺 EMT6細(xì)胞
4T1 KL0153 小鼠乳癌細(xì)胞 4T1細(xì)胞
S37 KL0154 小鼠肉瘤 S37細(xì)胞
CASC214 KL0155 小鼠前列腺癌細(xì)胞,RM-1細(xì)胞, RM-1
MC-3T3 KL0156 小鼠前成骨細(xì)胞,MC-3T3細(xì)胞
CASC125 KL0157 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞,L Wnt-3A細(xì)胞, L Wnt-3A
A9 KL0158 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞,A9細(xì)胞
JB6-C41 KL0159 小鼠皮膚細(xì)胞,JB6-C41細(xì)胞
JB6-C30 KL0160 小鼠皮膚細(xì)胞,JB6-C30細(xì)胞
JRDC129 KL0161 小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞,B16-F10細(xì)胞, B16-F10
STO KL0162 小鼠胚胎纖維細(xì)胞,STO細(xì)胞