產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102055 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | NRK |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
NRK正常大鼠腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
NRK正常大鼠腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
NRK正常大鼠腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
NRK正常大鼠腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
// KL0102 胸膜細(xì)胞瘤) SMC-1細(xì)胞 SMC-1
NBLE KL0103 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞,NBLE細(xì)胞
NBTF KL0104 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,NBTF細(xì)胞
KL0105 新鞘氨醇單胞菌 NBRC16725
KL0106 謝氏丙酸桿菌 CICC 10019
HTB-171 KL0107 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446 [H446]細(xì)胞 NCI-H446 [H446]
TA2 KL0108 小鼠自發(fā)高乳腺癌細(xì)胞,TA2細(xì)胞
U14 KL0109 小鼠子宮頸癌細(xì)胞,U14細(xì)胞
L13T3 KL0110 小鼠脂肪細(xì)胞,L13T3細(xì)胞
CL-173 KL0111 小鼠脂肪細(xì)胞,3T3-L1細(xì)胞 3T3-L1
NCTC1469 KL0112 小鼠正常肝細(xì)胞,NCTC1469細(xì)胞
PC61 KL0113 小鼠雜交瘤細(xì)胞CD25 PC61細(xì)胞
ST2/o KL0114 小鼠雜交瘤細(xì)胞,ST2/o細(xì)胞
CRL-2594 KL0115 小鼠原成骨細(xì)胞,MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 14
BaF3 KL0116 小鼠原B細(xì)胞株 BaF3細(xì)胞
MPC-83 KL0117 小鼠*腺泡細(xì)胞癌細(xì)胞,MPC-83細(xì)胞
LTPA KL0118 小鼠*癌細(xì)胞,LTPA細(xì)胞
CASC036 KL0119 小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞,Beta-TC-6細(xì)胞, Beta-TC-6
NIT-1 KL0120 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原) NIT-1細(xì)胞
LGZC210 KL0121 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞,NIT-1β細(xì)胞, NIT-1β
CASC156 KL0122 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞,MS1細(xì)胞, MS1
Min6 KL0123 小鼠胰島β細(xì)胞株 Min6細(xì)胞
WEHI-3 KL0124 小鼠血細(xì)胞,WEHI-3細(xì)胞
JRDC088 KL0125 小鼠血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞,EOMA細(xì)胞, EOMA
BV2 KL0126 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,BV2細(xì)胞
JRDC022 KL0127 小鼠胃癌細(xì)胞,MFC細(xì)胞, MFC
M5076 KL0128 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤 M5076細(xì)胞
HPT-8 KL0129 小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞,HPT-8細(xì)胞
DCS KL0130 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞,DCS細(xì)胞
JRDC021 KL0131 小鼠樹突狀細(xì)胞,DC2.4細(xì)胞,
RGC-5 KL0132 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞株細(xì)胞,RGC-5細(xì)胞
Mouse podocyte KL0133 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞