產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102056 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | NRK49F |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
NRK49F正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性)完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
NRK49F正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性)凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
NRK49F正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性)復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
NRK49F正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽(yáng)性)復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
CASC026 KL0070 雜交瘤細(xì)胞抗AChE AE-1細(xì)胞, AE-1
PC 61 5.3 KL0071 雜交瘤細(xì)胞CD25 PC 61 5.3 細(xì)胞
OKT3 KL0072 雜交瘤(抗CD3) OKT3細(xì)胞
KL0073 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌 ATCC 29191
TC-jcyj0052 KL0074 圓弧青霉
CRL-1687 KL0075 原位*腺癌細(xì)胞,BxPC-3細(xì)胞 BxPC-3
KL0076 宇佐美曲霉 ACCC 30339
MV-1-Lu KL0077 鼬肺上皮細(xì)胞,MV-1-Lu細(xì)胞
CCL-10 KL0078 幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞,BHK細(xì)胞 BHK
NP69-SV40T KL0079 永生化鼻咽上皮細(xì)胞系 NP69-SV40T細(xì)胞
KL0080 熒光威克酵母 ACCC 20058
U2OS-Luc teT-on KL0081 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞
TC-jcyj0024 KL0082 熒光假單胞菌
TC-jcyj0062 KL0083 *雙歧桿菌 ATCC 15697
KL0084 隱甲藻 ATCC30772
TC-jcyj0021 KL0085 陰溝腸桿菌
KL0086 異型酒香酵母 ACCC 20234
KL0087 已型副傷寒沙門(mén)氏菌 CMCC(B) 50094
TC-jcyj0045 KL0088 乙型溶血性鏈球菌
KL0089 乙酸鈣不動(dòng)桿菌 ATCC23055
CRL-1469 KL0090 *癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞 PANC-1
TC-jcyj0023 KL0091 洋蔥假單胞菌 ATCC 25416
CCL-25 KL0092 羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞 WISH
KL0093 煙酸芽孢桿菌 NBRC15566
KL0094 煙曲霉 ACCC 30367
KL0095 亞利桑那沙門(mén)氏菌 CMCC(B) 47001
KL0096 熏衣草灰鏈霉菌 ATCC13306
Ramos KL0097 血細(xì)胞瘤細(xì)胞系 Ramos細(xì)胞
BHK-21 KL0098 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞,BHK-21細(xì)胞
KL0099 許旺酵母變種 CCRC 20332
KL0100 許旺酵母 ACCC 20194
KL0101 休哈塔假絲酵母 ATCC34887