產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102058 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | RMC |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
RMC大鼠腎系膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
RMC大鼠腎系膜細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
RMC大鼠腎系膜細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
RMC大鼠腎系膜細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL0037 中華根霉 ACCC 30301
CRL-1657 KL0038 中國倉鼠體細(xì)胞,R 1610(細(xì)胞 R 1610(
CHO/dhFr- KL0039 中國倉鼠腎細(xì)胞(二氫葉酸還原酶缺陷型) CHO/dhFr-細(xì)胞
CTLA4 Ig-24 KL0040 中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CTLA4 Ig-24細(xì)胞
JRDC083 KL0041 中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO細(xì)胞, CHO
V79 KL0042 中國倉鼠肺細(xì)胞,V79細(xì)胞
CCL-93 KL0043 中國倉鼠肺細(xì)胞,V79-4細(xì)胞 V79-4
CHL KL0044 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL細(xì)胞
CRL-1935 KL0045 中國倉鼠肺細(xì)胞,CHL/IU [ CHL-11 ]細(xì)胞 CHL/IU [ CHL-11 ]
CRL-9096 KL0046 中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞,CHO/dhFr-細(xì)胞 CHO/dhFr-
CHO-K1 KL0047 中國倉鼠倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1細(xì)胞
R1610 KL0048 中國倉鼠倉鼠肺細(xì)胞,R1610細(xì)胞
CASC154 KL0049 中國倉鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤 MR1細(xì)胞, MR1
TC-jcyj0042 KL0050 致病性大腸埃希氏菌
TC-jcyj0072 KL0051 植物乳桿菌
TM4 KL0052 正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞,TM4細(xì)胞
TM3 KL0053 正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞,TM3細(xì)胞
L-02 KL0054 正常人肝細(xì)胞,L-02細(xì)胞
NRK KL0055 正常大鼠腎細(xì)胞,NRK細(xì)胞
// KL0056 整合SV40 基因的乳腺上皮細(xì)胞,HBL-100細(xì)胞 HBL-100
TC-jcyj0048 KL0057 赭曲霉
TC-jcyj0095 KL0058 赭綠青霉
KL0059 沼澤紅假單胞菌 DSM5859
CCL-13 KL0060 張氏肝細(xì)胞,HeLa [ Chang Liver ]細(xì)胞 HeLa [ Chang Liver ]
TC-jcyj0039 KL0061 粘質(zhì)沙雷氏菌
TC-jcyj0150 KL0062 粘質(zhì)沙雷伯氏菌
KL0063 粘紅酵母 ACCC 20030
MEF KL0064 早代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,MEF細(xì)胞
A-kata(+) KL0065 暫不提供 A-kata(+)細(xì)胞
TC-jcyj0036 KL0066 雜色曲霉
B6YH4 KL0067 雜交瘤細(xì)胞枝原體陽性 B6YH4細(xì)胞
OKT 11 KL0068 雜交瘤細(xì)胞抗CD2 OKT 11細(xì)胞
35.1 KL0069 雜交瘤細(xì)胞抗CD2 35.1細(xì)胞