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PUMC-mips-A5小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國(guó)/美國(guó)
  • 貨號(hào):kl-CC102069
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 中國(guó)/美國(guó)
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號(hào) kl-CC102069
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 PUMC-mips-A5
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

PUMC-mips-A5小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

PUMC-mips-A5小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。

PUMC-mips-A5小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

PUMC-mips-A5小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

KL-pc-r007 支氣管上皮細(xì)胞 Tracheal epithelial cells

KL-pc-r008 支氣管成纖維細(xì)胞 Tracheal fibroblasts cells

KL-pc-r009 肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 Pulmonary vein smooth musclecells

KL-pc-r010 肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Aorta smooth muscle cell lung

KL-pc-r011 肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Aorta epithelial cells

KL-pc-r012 肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 Aorta fibroblasts cells

KL-pc-r013 肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Pulmonary vein epithelial cells

KL-pc-r014 氣管和支氣管上皮細(xì)胞 Tracheal and bronchialepithelial cells

KL-pc-r015 心肌細(xì)胞(成年) Myocardial cells

KL-pc-r016 心臟纖維原細(xì)胞 Cardiac fibroblasts

KL-pc-r017 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Aortic endothelial cells

KL-pc-r018 主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Aortic smooth muscle cells

KL-pc-r019 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 SaKLenous vein smooth musclecells

KL-pc-r020 冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Coronary artery smooth musclecells

KL-pc-r021 大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 SaKLenous vein endothelial cells

KL-pc-r022 冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Coronary artery endothelialcells

KL-pc-r023 大鼠心肌細(xì)胞(成年)

KL-pc-r024 大鼠心肌細(xì)胞(新生大鼠)

KL-pc-r025 大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞

KL-pc-r026 食管上皮細(xì)胞 EsoKLageal epithelial cells

KL-pc-r027 食管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞 EsoKLageal smooth muscle cellsof the cell

KL-pc-r028 腸平滑肌細(xì)胞 Intestinal smooth muscle cells

KL-pc-r029 腸粘膜上皮細(xì)胞 Intestinal mucosa epithelialcells

KL-pc-r030 腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Im artery endothelial cells

KL-pc-r031 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Im venous endothelial cells

KL-pc-r032 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 The liver parencKLma cells

KL-pc-r033 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Hepatic artery endothelial cells

KL-pc-r034 肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Hepatic artery smooth musclecells

KL-pc-r035 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 Intrahepatic biliary epithelialcells

KL-pc-r036 胃粘膜上皮細(xì)胞 Gastric epithelial cells

KL-pc-r037 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 Sinusoidal endothelial cells

 


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