產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102072 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | PUMC-mips-B4 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
PUMC-mips-B4小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
PUMC-mips-B4小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
PUMC-mips-B4小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
PUMC-mips-B4小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL-pc-h073 腎上皮細(xì)胞 Kidney epithelial cells
KL-pc-h074 輸尿管上皮細(xì)胞 Ureter epithelium
KL-pc-h075 腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞 Renal parencKLmal cells
KL-pc-h076 腎系膜細(xì)胞 Mesangial cells
KL-pc-h077 膀胱上皮細(xì)胞 Bladderepithelial cells
KL-pc-h078 膀胱平滑肌細(xì)胞 Bladdersmooth muscle cells
KL-pc-h079 腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Renal artery endothelial cells
KL-pc-h080 腎動脈平滑肌細(xì)胞 Renal arterysmooth muscle cells
KL-pc-h081 腎成纖維細(xì)胞 Renalfibroblastscells
KL-pc-h082 膀胱成纖維細(xì)胞 Bladderfibroblastscells
KL-pc-h083 尿道上皮細(xì)胞 Urothelial cells
KL-pc-h084 腎足突細(xì)胞 Renal podocytes
KL-pc-h085 胎盤羊膜細(xì)胞 Placental amniotic cells
KL-pc-h086 胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞 Placental troKLoblast cells
KL-pc-h087 胎盤絨毛膜細(xì)胞 Placental chorionic cells
KL-pc-h088 子宮平滑肌細(xì)胞 Uterine smooth muscle cells
KL-pc-h089 子宮成纖維細(xì)胞 Uterinefibroblastscells
KL-pc-h090 卵巢上皮細(xì)胞 Uterine smooth muscle cells
KL-pc-h091 卵巢成纖維細(xì)胞 Ovary fibroblasts
KL-pc-h092 卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Ovarian microvascularendothelial cells
KL-pc-h093 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 Endometrial epithelial cells
KL-pc-h094 子宮頸上皮細(xì)胞 Cervical epithelial cells
KL-pc-h095 睪丸支持細(xì)胞 Sertoli cells
KL-pc-h096 淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 LymKLatic endothelial cells
KL-pc-h097 淋巴纖維原細(xì)胞 LymKLatic fibroblasts cells
KL-pc-h098 淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞 LymKLatic endothelial cells
KL-pc-h099 外周血白細(xì)胞
KL-pc-h100 臍帶單核細(xì)胞 Umbilical monocytes
KL-pc-h101 乳腺上皮細(xì)胞 Breast epithelial cells
KL-pc-h102 乳腺成纖維細(xì)胞 Breastfibroblasts cells