產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102077 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | PUMC-mips-D2 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC4011 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 MSCGS
KLC4012 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 MSCGS-sf
KLC4013 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子-無動物組分 MSCGS-acf
KLC4014 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化生長因子 MCDS
KLC4015 乳腺上皮細(xì)胞生長因子 MEpiCGS
KLC4016
KLC4017 Cell Culture Reagents
KLC4018 重組人血清白蛋白 rHSA
KLC4019 胎牛血清 FBS
KLC4020 胎牛血清 FBS
KLC4021 胰酶/EDTA消化液 T/E
KLC4022 胰酶中和液 TNS
KLC4023 胰酶中和液-無血清 TNS-sf
KLC4024 非酶細(xì)胞裂解液 ECDS
KLC4025 細(xì)胞凍存液 CFM
KLC4026 無血清細(xì)胞凍存液 SF-CFM
KLC4027 人胚胎干細(xì)胞凍存液 StemCryo
KLC4028 人胚胎干細(xì)胞凍存液 StemCryo
KLC4029 大豆胰蛋白酶抑制劑 STI
KLC4030 臺盼藍(lán) TB
KLC4031 磷酸鹽緩沖液 DPBS
KLC4032 平衡鹽溶液 HBSS
KLC4033 多聚賴氨酸 PLL
KLC4034 多聚賴氨酸 PLL
KLC4035 0.2%的明膠溶液 GSN
KLC4036 胎牛血清 FBS
KLC4037 青霉素/鏈霉素溶液 P/S
KLC4038 青霉素/鏈霉素溶液 P/S
KLC4039 抗真菌溶液 AMS
KLC4040 抗菌/抗霉菌溶液 ABAMS
KLC4041 嘌呤霉素 PURO-10
KLC4042 嘌呤霉素 PURO-1
KLC4043 支原體抑制劑 MIS