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PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國/美國
  • 貨號:kl-CC102077
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 中國/美國
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號 kl-CC102077
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 PUMC-mips-D2
保質(zhì)期 12個月個月

PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。

PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

PUMC-mips-D2小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

KLC4011 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 MSCGS

KLC4012 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 MSCGS-sf

KLC4013 間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子-無動物組分 MSCGS-acf

KLC4014 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化生長因子 MCDS

KLC4015 乳腺上皮細(xì)胞生長因子   MEpiCGS

KLC4016

KLC4017 Cell Culture Reagents

KLC4018 重組人血清白蛋白 rHSA

KLC4019 胎牛血清 FBS

KLC4020 胎牛血清 FBS

KLC4021 胰酶/EDTA消化液 T/E

KLC4022 胰酶中和液 TNS

KLC4023 胰酶中和液-無血清 TNS-sf 

KLC4024 非酶細(xì)胞裂解液 ECDS

KLC4025 細(xì)胞凍存液 CFM

KLC4026 無血清細(xì)胞凍存液   SF-CFM

KLC4027 人胚胎干細(xì)胞凍存液 StemCryo

KLC4028 人胚胎干細(xì)胞凍存液 StemCryo

KLC4029 大豆胰蛋白酶抑制劑 STI

KLC4030 臺盼藍(lán) TB

KLC4031 磷酸鹽緩沖液 DPBS

KLC4032 平衡鹽溶液 HBSS

KLC4033 多聚賴氨酸 PLL

KLC4034 多聚賴氨酸 PLL

KLC4035 0.2%的明膠溶液 GSN

KLC4036 胎牛血清 FBS

KLC4037 青霉素/鏈霉素溶液 P/S

KLC4038 青霉素/鏈霉素溶液 P/S

KLC4039 抗真菌溶液 AMS

KLC4040 抗菌/抗霉菌溶液 ABAMS

KLC4041 嘌呤霉素 PURO-10

KLC4042 嘌呤霉素 PURO-1

KLC4043 支原體抑制劑 MIS

 


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