產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102078 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | PUMC-mips-D3 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
PUMC-mips-D3小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
PUMC-mips-D3小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
PUMC-mips-D3小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
PUMC-mips-D3小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3977 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長因子 OKGS
KLC3978 結(jié)腸上皮細(xì)胞生長因子 CoEpiCGSS
KLC3979 支氣管上皮細(xì)胞生長因子 BEpiCGS
KLC3980 小氣道上皮細(xì)胞生長因子 SAEpiCGS
KLC3981 骨骼肌細(xì)胞生長因子 SkMCGS
KLC3982 胸腺上皮細(xì)胞生長因子 TyEpiCGS
KLC3983 上皮細(xì)胞生長因子 EpiCGS
KLC3984 上皮細(xì)胞生長因子-2 EpiCGS-2
KLC3985 動(dòng)物上皮細(xì)胞生長因子-2 EpiCGS-a
KLC3986 腎系膜細(xì)胞生長因子 MCGS
KLC3987 尿道上皮細(xì)胞生長因子 UCGS
KLC3988 前列腺上皮細(xì)胞生長因子 PEpiCGS
KLC3989 睪丸間質(zhì)細(xì)胞生長因子 LCGS
KLC3990 塞爾托利氏細(xì)胞生長因子 SerCGS
KLC3991 成骨細(xì)胞生長因子 ObGS
KLC3992 軟骨細(xì)胞生長因子 CGS
KLC3993 滑膜細(xì)胞生長因子 SGS
KLC3994 髓核細(xì)胞生長因子 NPCGS
KLC3995 肝細(xì)胞生長因子 HGS
KLC3996 星形細(xì)胞生長因子 SteCGS
KLC3997 人胚胎干細(xì)胞生長因子 50X StemGS
KLC3998 無異種多功能干細(xì)胞生長因子 50X StemGS-XF
KLC3999 心肌細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基生長因子 CSGS
KLC4000 心肌細(xì)胞平面培養(yǎng)基生長因子 CPMS
KLC4001 心肌細(xì)胞生長因子 CMGS
KLC4002 角膜上皮細(xì)胞生長因子 CEpiCGS
KLC4003 小梁網(wǎng)細(xì)胞生長因子 TMCGS
KLC4004 滋養(yǎng)層細(xì)胞生長因子 TGS
KLC4005 前脂肪細(xì)胞分化生長因子 PAdDS
KLC4006 前脂肪細(xì)胞生長因子 PAGS
KLC4007 脂肪細(xì)胞生長因子 AdGS
KLC4008 卵巢上皮細(xì)胞生長因子 OEpiCGS
KLC4009 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化生長因子 MODS
KLC4010 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪分化生長因子 MADS