產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102110 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | Mv1Lu(NBL-7) |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
Mv1Lu(NBL-7)水貂肺細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
Mv1Lu(NBL-7)水貂肺細(xì)胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
Mv1Lu(NBL-7)水貂肺細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
Mv1Lu(NBL-7)水貂肺細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3568 人顱骨成骨細(xì)胞 HCO
KLC3569 人股骨成骨細(xì)胞 HO-f
KLC3570 人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 HC-a
KLC3571 人滑膜細(xì)胞 HS
KLC3572 人髓核細(xì)胞 HNPC
KLC3573 人脊髓纖維環(huán)細(xì)胞 HAPC
KLC3574
KLC3575 肝細(xì)胞系統(tǒng)
KLC3576 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 HHSEC
KLC3577 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 HIBEpiC
KLC3578 人肝細(xì)胞 HH
KLC3579 人肝細(xì)胞 HH
KLC3580 人肝星形細(xì)胞 HHSteC
KLC3582 膽囊細(xì)胞系統(tǒng)
KLC3583 人膽囊成纖維細(xì)胞 HGBF
KLC3584 脾細(xì)胞系統(tǒng)
KLC3585 人脾血管內(nèi)皮細(xì)胞 HSEC
KLC3586 人脾成纖維細(xì)胞 HSF
KLC3587
KLC3588 心臟細(xì)胞系統(tǒng)
KLC3589 人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 HCMEC
KLC3590 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 HCAEC
KLC3591 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞 HAEC
KLC3592 人主動脈平滑肌細(xì)胞 HASMC
KLC3593 人主動脈成纖維細(xì)胞 HAF
KLC3594 人心肌細(xì)胞 HCM
KLC3595 人心肌細(xì)胞--成人 HCM-a
KLC3596 人心臟成纖維細(xì)胞 HCF
KLC3597 人心臟成纖維細(xì)胞--成人心室 HCF-av
KLC3598 人心臟成纖維細(xì)胞--成人心房 HCF-aa
KLC3599 人心臟成纖維細(xì)胞--成人 HCF-a
KLC3600 人心臟成纖維細(xì)胞--胎兒心房 HCF-fa
KLC3601 人心包成纖維細(xì)胞 HPcF
KLC3602
KLC3603 干細(xì)胞衍生產(chǎn)品
KLC3604 人多功能干細(xì)胞來源的心肌細(xì)胞