產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102115 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | PK(15) |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
PK(15)豬腎細胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
PK(15)豬腎細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
PK(15)豬腎細胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
PK(15)豬腎細胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行實驗。
C. 細胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復(fù)。
D.細胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3466人黑色素細胞--胎兒HEM-f
KLC3467人真皮成纖維細胞--胎兒HDF-f
KLC3468人真皮成纖維細胞--新生HDF-n
KLC3469人真皮成纖維細胞--成人HDF-a
KLC3475
KLC3476毛發(fā)細胞系統(tǒng)
KLC3477人毛乳頭細胞HHDPC
KLC3478人生發(fā)基質(zhì)細胞HHGMC
KLC3479人毛囊外根鞘細胞HHORSC
KLC3480人毛囊內(nèi)根鞘細胞HHIRSC
KLC3481人毛囊角質(zhì)細胞HHFK
KLC3482
KLC3483淋巴細胞系統(tǒng)
KLC3484人淋巴內(nèi)皮細胞HLEC
KLC3485人淋巴成纖維細胞HLF
KLC3486人扁桃體上皮細胞HTEpiC
KLC3487人扁桃體成纖維細胞HTF
KLC3488人胸腺上皮細胞HTyEpiC
KLC3489人胸腺成纖維細胞HTyF
KLC3490口腔細胞系統(tǒng)
KLC3491人口腔微血管內(nèi)皮細胞HOMEC
KLC3492人口腔角質(zhì)細胞HOK
KLC3493人牙齦成纖維細胞HGF
KLC3494人牙周膜成纖維細胞HPLF
KLC3495
KLC3496胃腸細胞系統(tǒng)
KLC3497人食道微血管內(nèi)皮細胞HEEpiC
KLC3498人食道平滑肌細胞HESMC
KLC3499人食管上皮細胞HEEpiC
KLC3500人食管成纖維細胞HEF