產地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102116 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | ST |
保質期 | 12個月個月 |
ST豬睪丸細胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
ST豬睪丸細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
ST豬睪丸細胞復蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內;
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內有液氮進入,需擰松凍存管,排出內部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內;
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
ST豬睪丸細胞復蘇注意事項如下:
A.復蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應該檢查凍存管是否擰緊。取出復蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數細胞均無法立即適應不同基礎培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因實驗需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行實驗。
C. 細胞復蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復。
D.細胞復蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經適宜。
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KLC3433 人腦干神經元 HN-bs
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KLC3435 人少突膠質前體細胞--懸浮生長 HOPC-os
KLC3436 人少突膠質細胞 HO
KLC3437 人少突膠質前體細胞--新鮮 HOPC-f
KLC3438 HOPC-f40
KLC3439 HOPC-f80
KLC3440 HOPC-f20
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KLC3444 HA
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KLC3447 人脊髓星形膠質細胞 HA-sp
KLC3448 人海馬星形膠質細胞 HA-h
KLC3449 人星形膠質細胞--腦干 HA-bs
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KLC3455 人真皮微血管內皮細胞 HDMEC
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KLC3459 人表皮角質細胞--新生 HEK-n
KLC3460 人表皮角質細胞--成人 HEK-a
KLC3461 人表皮角質細胞--胎兒 HKf
KLC3462 人表皮黑色素細胞--淺色素 HEM-l
KLC3463 人表皮黑色素細胞--中色素 HEM-m
KLC3464 人表皮黑色素細胞--深色素 HEM-d
KLC3465 人黑色素細胞--成人 HM