產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102121 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | WCH-17 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3361 人結(jié)腸癌細(xì)胞 SW620-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3362 人原位*腺癌細(xì)胞 BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3363 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3364 人肺癌細(xì)胞 PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3365 S8-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3366 豬腎上皮細(xì)胞 PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3367 狗腎上皮細(xì)胞 MDCK-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3368 猴胚胎腎上皮細(xì)胞 marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3369 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3370 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3371 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 F98-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3372 人宮頸癌細(xì)胞 Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3373 大鼠乳腺癌細(xì)胞 MADB-106-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3374 人肺癌細(xì)胞 A549-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3375 人肝癌細(xì)胞 97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3376 人肝癌細(xì)胞 97H-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3377 人胚腎細(xì)胞 293XL-hTLR7
KLC3378 人胚腎細(xì)胞 293XL-hTLR9
KLC3379 人腎癌細(xì)胞 A498-EGFP-puro
KLC3380 小鼠成纖維細(xì)胞 L929-EGFP-puro
KLC3381 人胃癌細(xì)胞 BGC-823-EGFP-puro
KLC3382 小鼠肝癌細(xì)胞 Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3383 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9-EGFP-puro
KLC3384 小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC-RFP-puro
KLC3385 人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5-EGFP+puro
KLC3386 人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 OS-EGFP+puro
KLC3387 人肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H
KLC3388 人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L
KLC3389 微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs
KLC3390 多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系 MES23.5
KLC3391 人骨肉瘤細(xì)胞 HOS
KLC3392 小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12
KLC3393 非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞 MA104
KLC3394 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H226
KLC3395 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MCA38