|
| 產(chǎn)地 | 中國/美國 |
| 品牌 | KALANG/進口品牌 |
| 貨號 | kl-CC102122 |
| 保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
| 英文名稱 | CHO/dhFr- |
| 保質(zhì)期 | 12個月個月 |
CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型完全培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣；多角形
細(xì)胞傳代：1:2-1:4傳代；每周2-3次
CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型凍存步驟：我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化，有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞，不同細(xì)胞離心率不一樣（以上僅為貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞收集就用第四部）
⑸ 吸出離心管上清液，加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞，移到凍存管，放4度半小時，-20 度兩小時，-70度過夜，再放液氮長期保存。
CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型復(fù)蘇操作步驟如下：
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫，回溫后將其用75%酒精擦拭，移入無菌操作臺內(nèi)；
2 戴上護目鏡，厚毛線手套之后，從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入，需擰松凍存管，排出內(nèi)部殘留的液氮，之后擰緊凍存管，放入37-40℃水浴中，并不時搖動，使其迅速融化，以足量75%酒精擦拭之，轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi)；
3 在1,000 rpm下離心5～10分鐘，棄去上清液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng)；
4 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高，及時傳代；否則，及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
CHO/dhFr-中國倉鼠卵巢細(xì)胞－二氫葉酸還原酶缺陷型復(fù)蘇注意事項如下：
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全，尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入，請一定要擰松凍存管，排出液氮，防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同，須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素（G418等），以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3329 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 F98
KLC3330 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9
KLC3331 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 R9[P9R]
KLC3332 BN
KLC3333 小鼠B淋巴細(xì)胞 WEHI-231
KLC3334 143B
KLC3335 人腎癌細(xì)胞 A498
KLC3336 人肝癌細(xì)胞 97H
KLC3337 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 Ishikawa
KLC3338 人膽管癌細(xì)胞 QBC939
KLC3339 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Bend3
KLC3340 口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 HN13
KLC3341 人*癌細(xì)胞 MiaCaPa-2
KLC3342 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16-F0-EGFP （穩(wěn)定株）
KLC3343 人膀胱癌細(xì)胞 T24-EGFP（CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3344 人宮頸癌細(xì)胞 Hela-Luc （穩(wěn)定株）
KLC3345 人單核細(xì)胞 THP1-Blue （穩(wěn)定株）
KLC3346 人單核細(xì)胞 THP1-Blue-CD14（穩(wěn)定株）
KLC3347 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-RFP（慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株）
KLC3348 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW480-EGFP-puro [SW480-pSB4]（慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3349 人骨髓瘤細(xì)胞 OPM-2-UBC-EGFP（穩(wěn)定株）
KLC3350 人骨髓瘤細(xì)胞 NCI-H929-UBC-EGFP（穩(wěn)定株）
KLC3351 人骨髓瘤細(xì)胞 OPM-2-CMV-EGFP（穩(wěn)定株）
KLC3352 人骨髓瘤細(xì)胞 NCI-H929-CMV-EGFP（穩(wěn)定株）
KLC3353 小鼠軟骨細(xì)胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP]（穩(wěn)定株）
KLC3354 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7]（慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3355 人舌鱗癌細(xì)胞 Tca-8113-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3356 人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3357 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG-EGFP（Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3358 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP（Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3359 人食管癌細(xì)胞 Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
KLC3360 人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)
