產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102166 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
幼兔腎上皮樣細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
幼兔腎上皮樣細(xì)胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
幼兔腎上皮樣細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
幼兔腎上皮樣細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL1052 ECGS 內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 Endothelial Cell Growth Supplement 5 ml
KL1152 SMCGS 平滑肌細(xì)胞生長因子 Smooth Muscle Cell Growth Supplement 5 ml
KL1162 SMCGS-sf 平滑肌細(xì)胞生長因子(不含血清) Smooth Muscle Cell Growth Supplement 5 ml
KL1252 PGS 周細(xì)胞生長因子 Pericyte Growth Supplement 5 ml
KL1452 MenCGS 腦膜細(xì)胞生長因子 Meningeal Cell Growth Supplement 5 ml
KL1552 NPrCGS 神經(jīng)前體細(xì)胞生長因子 Neural Precursor Cell Growth Supplement 5 ml
KL1562 NGS 神經(jīng)元生長因子 Neuronal Growth Supplement 5 ml
KL1572 NPCDS 神經(jīng)前體細(xì)胞分化生長因子 Neural Precursor Cell Differentiation Supplement 5 ml
KL1652 OPCGS 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長因子 Oligodendrocyte Precursor Cell Growth Supplement 5 ml
KL1662 OGS 少突膠質(zhì)細(xì)胞生長因子 Oligodendrocyte Growth Supplement 5 ml
KL1672 OPCDS 少突膠質(zhì)前體分化生長因子 Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Supplement 5 ml
KL1752 SCGS 雪旺細(xì)胞生長因子 Schwann Cell Growth Supplement 5 ml
KL1852 AGS 星形細(xì)胞生長因子 Astrocyte Growth Supplement 5 ml
KL1882 AGS-a 星形細(xì)胞生長因子-動物 Astrocyte Growth Supplement-Animal 5 ml
KL1952 MGS 小膠質(zhì)細(xì)胞生長因子 Microglia Growth Supplement 5 ml
KL1972 MGS 巨噬細(xì)胞生長因子 Macrophage Growth Supplement 50 ml
KL2152 KGS 角質(zhì)細(xì)胞生長因子 Keratinocyte Growth Supplement 5 ml
KL2162 KGS-2 角質(zhì)細(xì)胞生長因子(不含 BPE) BPE-free Keratinocyte Growth Supplement 5 ml
KL2172 KGS-acf 角質(zhì)細(xì)胞生長因子(不含動物成分) Keratinocyte Growth Supplement-animal component free 5 ml
KL2252 MelGS 黑色素細(xì)胞生長因子 Melanocyte Growth Supplement 5 ml