產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102177 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | D.Mel |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
D.Mel黑腹果蠅胚胎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
D.Mel黑腹果蠅胚胎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
D.Mel黑腹果蠅胚胎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
D.Mel黑腹果蠅胚胎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL103-01H rhTNF-α-His 重組人腫瘤壞死因子-α,His Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha,His 10μg
KL103-01V rhTNF-α Vari 重組人腫瘤壞死因子-αVariant Recombinant Human Tumor Necrosis Factor- alpha Variant 10μg
KL103-04 rhBAF 重組人B細(xì)胞活化因子 Recombinant Human B Cell Activating Factor 5μg
KL103-08 rhOSM 重組人抑瘤素-M Recombinant Human Oncostatin-M 2μg
KL103-08T rhOSM 209a.a. 重組人抑瘤素-M209a.a. Recombinant Human Oncostatin-M 209a.a. 2μg
KL103-09 rhAK1-3 重組人血管抑素K1-3 Recombinant Human Angiostatin K1-3 10μg
KL103-12 rhEndostatin 重組人血管內(nèi)皮抑素 Recombinant Human Endostatin 2μg
KL104-01 rhaFGF 重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子--酸性 Recombinant Human Fibroblast Growth Factor- acidic 10μg
KL104-02 rhbFGF 重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子--堿性 Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic 10μg
KL104-07 rhKGF-1 重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-1 Recombinant Human Keratinocye Growth Factor-1 2μg
KL104-09 rhFGF-9 重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-9 Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-9 5μg
KL104-10 rhKGF-2 重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2 "Recombinant Human Keratinocye Growth Factor-2
" 5μg
"KL104-19
" rhFGF-19 重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-19 "Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-19
" 5μg
"KL104-21
" rhFGF-21 重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-21 "Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-21
" 5μg
"KL105-01
" rhIGF-I 重組人IGF-I "Recombinant Human IGF-I
" 20μg
"KL105-01B
" rHuDES1-3/IGF1 重組人 DES1-3/ 胰島樣生長(zhǎng)因子 -1 "Recombinant Human DES1-3/ Insulin-Like Growth factor 1
" 20μg
"KL105-01B3
" rhIGF-BP3 重組人 IGF-BP3 "Recombinant Human IGF-BP3
" 5μg