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上海康朗生物科技有限公司
Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國/美國
  • 貨號:kl-CC102178
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 中國/美國
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號 kl-CC102178
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 Sf9
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。

Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

KL09231       DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml

KL09241     DMEM   DMEM   DMEM with High-Glucose - L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml

KL09251 -1L   DMEM-prf DMEM-prf DMEM with High Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate - phenol red-free 1L

KL09311   Ham's F-10 Ham's F-10 F-10 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml

KL09321   Ham's F-12 Ham's F-12 F-12 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml

KL09411     DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine 500 ml

KL09421     DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine and 15 mM HEPES 500 ml

KL09511 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI  1640 without L-Glutamine - with 25 mM HEPES 500 ml

KL09521   RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI  1640 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml

KL09611         IMDM   IMDM   MDM with L-Glutamine and 25 mM HEPES; without alpha-Thioglycerol - 2-mercaptoethanol   500 ml

KL102-01 rhSCF 重組人干細(xì)胞因子 Recombinant Human Stem Cell Factor 2μg

KL102-02 rhG-CSF 重組人粒細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor 2μg

KL102-03 rhGM-CSF 重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 5μg 

KL102-09 rhM-CSF 重組人巨噬細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Macrophage Colony Stimulating Factor 2μg

KL103-01 rhTNF-α 重組人腫瘤壞死因子-α Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha 10μg


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