產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102178 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | Sf9 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
Sf9草地夜蛾卵巢細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL09231 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml
KL09241 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml
KL09251 -1L DMEM-prf DMEM-prf DMEM with High Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate - phenol red-free 1L
KL09311 Ham's F-10 Ham's F-10 F-10 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09321 Ham's F-12 Ham's F-12 F-12 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09411 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine 500 ml
KL09421 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine and 15 mM HEPES 500 ml
KL09511 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 without L-Glutamine - with 25 mM HEPES 500 ml
KL09521 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09611 IMDM IMDM MDM with L-Glutamine and 25 mM HEPES; without alpha-Thioglycerol - 2-mercaptoethanol 500 ml
KL102-01 rhSCF 重組人干細(xì)胞因子 Recombinant Human Stem Cell Factor 2μg
KL102-02 rhG-CSF 重組人粒細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor 2μg
KL102-03 rhGM-CSF 重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 5μg
KL102-09 rhM-CSF 重組人巨噬細(xì)胞集落刺激因子 Recombinant Human Macrophage Colony Stimulating Factor 2μg
KL103-01 rhTNF-α 重組人腫瘤壞死因子-α Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha 10μg