產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102186 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | NK-92 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
NK-92人自然殺傷細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
NK-92人自然殺傷細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
NK-92人自然殺傷細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
NK-92人自然殺傷細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLR2100 REK-n 大鼠表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生 Rat Epidermal Keratinocytes-neonate 5 x 10^5 cells/vial
KLR2300 RDF-n 大鼠皮膚成纖維細(xì)胞 - 新生 Rat Dermal Fibroblasts - neonate 5 x 10^5 cells/vial
KLR2320 RDF-a 大鼠皮膚成纖維細(xì)胞-成年 Rat Dermal Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial
KLR2530 RLF 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Rat Lymphatic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR3200 RPAEpiC 大鼠肺泡上皮細(xì)胞 Rat Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial
KLR3300 RPF 大鼠肺成纖維細(xì)胞 Rat Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR4100 RRTEpiC 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 Rat Renal Tubular Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR4200 RRMC 大鼠腎系膜細(xì)胞 Rat Renal Mesangial Cells 5 x 10^5 cells per 1ml
KLR5300 RHSteC 大鼠肝星狀細(xì)胞 Rat Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR5340 RHMa 大鼠肝巨噬細(xì)胞 Rat Hepatic Macrophage 1x10^6 cells/vial
KLR6110 RASMC 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Rat Aortic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR6200 RCM 大鼠心肌細(xì)胞 Rat Cardiac Myocytes 1 x 10^6 cells/vial
KLR6300 RCF 心肌成纖維細(xì)胞 Rat Cardiac Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR6550 RLEpiC 大鼠晶狀體上皮細(xì)胞 Rat Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR7500 RMSC-bm 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 Rat Mesenchymal Stem Cells-bone marrow 5 x 10^5 cells/vial
KLR7540 RPMSC 大鼠肺間充質(zhì)干細(xì)胞 Rat Pulmonary Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial
豬細(xì)胞系統(tǒng)
KLP1870 PRA 豬視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞 Porcine Retinal Astrocytes 5 x 10^5 cells/vial
KLP6510 PCEpiC 豬角膜上皮細(xì)胞 Porcine Corneal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLP6540 PRPEpiC 豬視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 Porcine Retinal Pigment Epithelial Cells 6 x 10^5 cells/vial
KLP6550 PLEpiC 豬晶狀體上皮細(xì)胞 Porcine Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial