產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102235 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | BTL2013 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
BTL2013牛trim5α基因沉默細(xì)胞株完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
BTL2013牛trim5α基因沉默細(xì)胞株凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
BTL2013牛trim5α基因沉默細(xì)胞株復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
BTL2013牛trim5α基因沉默細(xì)胞株復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌?,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL4800 HNPC 人髓核細(xì)胞 Human Nucleus Pulposus Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL4810 HAPC 人脊髓纖維環(huán)細(xì)胞 Human Anulus Pulposus Cells 5 x 10^5 cells/vial
肝細(xì)胞系統(tǒng)
KL5000 HHSEC 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL5100 HIBEpiC 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 Human Intrahepatic Biliary Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL5200 HH 人肝細(xì)胞 Human Hepatocytes 1 x 10^6 cells/vial
KL5200-2 HH 人肝細(xì)胞 Human Hepatocytes 2 x 10^6 cells/vial
KL5300 HHSteC 人肝星形細(xì)胞 Human Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial
膽囊細(xì)胞系統(tǒng)
KL5430 HGBF 人膽囊成纖維細(xì)胞 Human Gallbladder Fibroblasts 5 x 10^5 cells per 1ml
脾細(xì)胞系統(tǒng)
KL5500 HSEC 人脾血管內(nèi)皮細(xì)胞 Human Splenic Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL5530 HSF 人脾成纖維細(xì)胞 Human Splenic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
心臟細(xì)胞系統(tǒng)
KL6000 HCMEC 人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL6020 HCAEC 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Human Coronary Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL6100 HAEC 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Human Aortic Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL6110 HASMC 人主動脈平滑肌細(xì)胞 Human Aortic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial
KL6120 HAF 人主動脈成纖維細(xì)胞 Human Aortic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial