產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102363 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | NBS |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
NBS新生牛睪丸支持細胞系完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
NBS新生牛睪丸支持細胞系凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
NBS新生牛睪丸支持細胞系復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
NBS新生牛睪丸支持細胞系復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌?,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行實驗。
C. 細胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復(fù)。
D.細胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLTC-axbz-137 鼠纖維肉瘤細胞系 WEHI 164
KLTC-axbz-138 小鼠B淋巴細胞 WEHI 231
編號 中文 英文名稱
KLTC-axbz-139 大鼠垂體細胞 RPC
KLTC-axbz-140 小鼠垂體細胞 MPC
KLTC-axbz-141 兔子垂體細胞
KLTC-axbz-142 狗垂體細胞
KLTC-axbz-143 鼠肝癌細胞系 MM45T.Li
KLTC-axbz-144 小鼠成纖維細胞系 McCoy
KLTC-axbz-145 大鼠肝癌細胞(乳腺癌細胞接種到*成瘤) Walker-256
KLTC-axbz-146 大鼠肝癌細胞(wistar 大鼠) CBRH7919
KLTC-axbz-147 小鼠結(jié)腸癌 C26
KLTC-axbz-148 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細胞株 SNL
KLTC-axbz-149 小鼠艾氏腹水瘤細胞 ECA
KLTC-axbz-150 褐鼠胰島素瘤上皮細胞 RIN-m
KLTC-axbz-151 小鼠雜交瘤細胞 ST2/o
KLTC-axbz-152 小鼠腎癌細胞 RenCa
KLTC-axbz-153 小鼠胰島素瘤β細胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原) NIT-1
KLTC-axbz-154 早代小鼠胚胎成纖維細胞 MEF
KLTC-axbz-155 中國倉鼠肺細胞 V79
KLTC-axbz-156 兔的肝細胞 VX2
KLTC-axbz-157 雞胚原代肝細胞 CEL
KLTC-axbz-158 129小鼠ES細胞 D3
KLTC-axbz-159 129小鼠ES細胞 E14
KLTC-axbz-160 BALB/c小鼠ES細胞 B/c-ES
KLTC-axbz-161 猴的骨髓間充質(zhì)干細胞 MSCS
KLTC-axbz-162 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞 SDBMSC
KLTC-axbz-163 鼠胸腺激酶缺陷細胞株 L-MTK
KLTC-axbz-164 鼠胚成纖維細胞系 STO
KLTC-axbz-165 鼠乳腺癌細胞系 MA-782
KLTC-axbz-166 鼠成纖維細胞系 GR
KLTC-axbz-167 雜交瘤細胞枝原體陽性 B6YH4
KLTC-axbz-168 鼠細胞系 B82