產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC337606 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | 3T3-L1 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLTC-hxbz-410 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 CRT
KLTC-hxbz-411 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172
KLTC-hxbz-412 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 SHG-44
KLTC-hxbz-413 人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 SF-295
KLTC-hxbz-414 人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 U87MG
KLTC-hxbz-415 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 SK-N-MC
KLTC-hxbz-416 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 SK-N-SH
KLTC-hxbz-417 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 SH-SY5Y
KLTC-hxbz-418 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(H4) H4
KLTC-hxbz-419 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系 U373
KLTC-hxbz-420 人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SW038-C2
KLTC-hxbz-421 轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細(xì)胞 SW038-C2-tk
KLTC-hxbz-422 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 BT-325
KLTC-hxbz-423 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 BE(2)C
KLTC-hxbz-424 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 BE(2)-M17
KLTC-hxbz-425 人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 SF-295
KLTC-hxbz-426 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長 HOPC-os
KLTC-hxbz-427 人跟骨髓瘤細(xì)胞 Hp2/o
KLTC-hxbz-428 人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 OS
KLTC-hxbz-429 人骨肉瘤細(xì)胞 SP20
KLTC-hxbz-430 人骨肉瘤細(xì)胞 SW1353
KLTC-hxbz-431 人成骨肉瘤細(xì)胞 Saos-2
KLTC-hxbz-432 人骨肉瘤細(xì)胞 HOS
KLTC-hxbz-433 人骨髓瘤細(xì)胞 U266
KLTC-hxbz-434 人骨髓瘤細(xì)胞 3T3D
KLTC-hxbz-435 人成骨肉瘤細(xì)胞 MG-63
KLTC-hxbz-436 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 RPMI-8226
KLTC-hxbz-437 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 A-204
編號(hào) 中文 英文名稱
KLTC-hxbz-438 胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞 FBM
KLTC-hxbz-439 人黑色素瘤細(xì)胞 HME1
KLTC-hxbz-440 人黑色素瘤細(xì)胞 HME4
KLTC-hxbz-441 人黑色素瘤細(xì)胞 HME6