產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC337709 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱(chēng) | HT22 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類(lèi),若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
CBRH7919 KL1622 大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠) CBRH7919細(xì)胞
LGZC212 KL1623 大鼠肝癌細(xì)胞,Walker-256細(xì)胞, Walker-256
RH-35 KL1624 大鼠肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞
H4-II-E-C3 KL1625 大鼠肝癌細(xì)胞,H4-II-E-C3細(xì)胞
H4-ⅡE KL1626 大鼠肝癌細(xì)胞,H4-ⅡE細(xì)胞
CRL-1548 KL1627 大鼠肝癌細(xì)胞,CRL-1548細(xì)胞
CBRH-7919 KL1628 大鼠肝癌細(xì)胞,CBRH-7919細(xì)胞
CRIC089 KL1629 大鼠肝癌 R15細(xì)胞, R15
RLE-6TN KL1630 大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞,RLE-6TN細(xì)胞
NR8383 KL1631 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,NR8383細(xì)胞
GH3 KL1632 大鼠埀體瘤細(xì)胞,GH3細(xì)胞
RPC KL1633 大鼠垂體細(xì)胞,RPC細(xì)胞
MMQ KL1634 大鼠垂體瘤細(xì)胞,MMQ細(xì)胞
GH3 KL1635 大鼠垂體瘤細(xì)胞,GH3細(xì)胞
208F KL1636 大鼠成纖維細(xì)胞,208F細(xì)胞
L6 KL1637 大鼠成肌細(xì)胞(分化)\L6細(xì)胞
JRDC008 KL1638 大鼠成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞, L6
ROS1728 KL1639 大鼠成骨細(xì)胞,ROS1728細(xì)胞
FAT KL1640 大鼠鼻咽癌細(xì)胞,FAT細(xì)胞
KL1641 大麗花輪枝孢 ACCC 30308
PCK KL1642 大黃魚(yú)腎細(xì)胞,PCK細(xì)胞
EPC KL1643 大黃魚(yú)EPC細(xì)胞,EPC細(xì)胞
KL1644 大腸桿菌 CCRC 11447
TC-jcyj0141 KL1645 大腸埃希氏菌O157:H7
KL1646 大腸埃希氏菌(大腸桿菌) CMCC44108
TC-jcyj0113 KL1647 大腸埃希氏菌 ATCC 35218
KL1648 大腸埃氏菌 8099
KL1649 大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 NRRL13970
KL1650 痤瘡丙酸桿菌 ATCC11827
TC-jcyj0169 KL1651 脆弱擬桿菌 ATCC 25285
KL1652 刺孢吸水鏈霉菌昆明變種 ACCC 40020
KL1653 刺孢吸水鏈霉菌 ACCC 40018
KL1654 創(chuàng)傷弧菌 ATCC 27562
TC-jcyj0056 KL1655 串珠鐮刀菌