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HAEC人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國(guó)/美國(guó)
  • 貨號(hào):kl-CC337727
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 中國(guó)/美國(guó)
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號(hào) kl-CC337727
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 HAEC
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

HAEC人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

HAEC人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。

HAEC人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

HAEC人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

MDCK (NBL-2) KL1291 馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞系 MDCK (NBL-2)細(xì)胞

TC-jcyj0070 KL1292 羅伊氏乳桿菌

MA104 KL1293 羅猴胎腎細(xì)胞,MA104細(xì)胞

CRL-1735 KL1294 卵巢細(xì)胞,Lec1細(xì)胞 Lec1

CRL-1978 KL1295 卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞,ES-2細(xì)胞 ES-2

HTB-77 KL1296 卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞 SK-OV-3

HTB-161 KL1297 卵巢癌細(xì)胞,NIH:OVCAR-3細(xì)胞 NIH:OVCAR-3

HO8910 KL1298 卵巢癌 HO8910細(xì)胞

KL1299 綠針假單胞菌 ATCC13985

U14-GFP KL1300 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞,U14-GFP細(xì)胞

MFC-GFP KL1301 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞,MFC-GFP細(xì)胞

MGC803-GFP KL1302 綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞,MGC803-GFP細(xì)胞

TC-jcyj0097 KL1303 綠色木霉

KL1304 綠膿假單胞菌(綠膿桿菌) CMCC10104

Vero KL1305 綠猴腎細(xì)胞,Vero細(xì)胞

RF/6A KL1306 綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞,RF/6A細(xì)胞

LLC-MK2 KL1307 綠猴恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞

KL1308 魯氏接合酵母 CICC 1379

TC-jcyj0125 KL1309 流感嗜血桿菌 ATCC 49247

KL1310 鱗癌VX-2(兔模型)

TC-jcyj0128 KL1311 淋病柰瑟氏菌 ATCC 49226

CRL-2570 KL1312 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,A3細(xì)胞 A3

TIB-160 KL1313 淋巴瘤細(xì)胞,YAC-1細(xì)胞 YAC-1

Raji人Burkitt's KL1314 淋巴瘤細(xì)胞,Raji人Burkitt's細(xì)胞

CCL-46 KL1315 淋巴瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 P388D1

TIB-39 KL1316 淋巴瘤細(xì)胞,EL4細(xì)胞 EL4

TIB-181 KL1317 淋巴瘤細(xì)胞,EL4. IL-2細(xì)胞 EL4. IL-2

KL1318 裂殖壺菌 ATCC20888

KL1319 亮白曲霉 CICC 2360

TC-jcyj0061 KL1320 兩歧雙歧桿菌 ATCC 29521

TC-jcyj0145 KL1321 痢疾志賀氏菌

KL1322 蠣灰鏈霉菌 ATCC27455

KL1323 鯉魚(yú)尾鰭細(xì)胞

 


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