產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC337746 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | SKM-1 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
SKM-1人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
SKM-1人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
SKM-1人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
SKM-1人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
CASC206 KL1129 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,RD細(xì)胞, RD
U87 MG KL1130 人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,U87 MG細(xì)胞
PLA-802 KL1131 人惡性橫紋肌肉瘤 PLA-802細(xì)胞
A375 KL1132 人惡性黑色素瘤細(xì)胞,A375細(xì)胞
CRL-2407 KL1133 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞,NK-92細(xì)胞 NK-92
T98G [T98-G] KL1134 人多形性惡性膠質(zhì)瘤 T98G [T98-G]細(xì)胞
RPMI-8226 KL1135 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞,RPMI-8226細(xì)胞
MHCC97-L KL1136 人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞,MHCC97-L細(xì)胞
95-C KL1137 人低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-C細(xì)胞
OCM-1A KL1138 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞,OCM-1A細(xì)胞
SGC7901 KL1139 人低分化胃癌細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞
MKN-45 KL1140 人低分化胃癌細(xì)胞,MKN-45細(xì)胞
BGC-823 KL1141 人低分化胃癌細(xì)胞,BGC-823細(xì)胞
SK-LU-1 KL1142 人低分化肺腺癌細(xì)胞,SK-LU-1細(xì)胞
LGZC083 KL1143 人低分化肺腺癌細(xì)胞,GLC82細(xì)胞, GLC82
CASC084 KL1144 人膽囊癌細(xì)胞,GBC-SD細(xì)胞, GBC-SD
HCCC-9810 KL1145 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞,HCCC-9810細(xì)胞
RBE KL1146 人膽管癌細(xì)胞,RBE細(xì)胞
QBC939 KL1147 人膽管癌細(xì)胞,QBC939細(xì)胞
THP-1 KL1148 人單核細(xì)胞白血病 THP-1細(xì)胞
CASC169 KL1149 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H661細(xì)胞, NCI-H661
NCI-H460 KL1150 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H460細(xì)胞
HASMC KL1151 人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞
WiDr KL1152 人大腸癌細(xì)胞,WiDr細(xì)胞
SW116 KL1153 人大腸癌細(xì)胞,SW116細(xì)胞
PA319 KL1154 人大腸癌細(xì)胞,PA319細(xì)胞
LGZC065 KL1155 人大腸癌細(xì)胞,KM-12細(xì)胞, KM-12
CL187/CCL187 KL1156 人大腸癌細(xì)胞,CL187/CCL187細(xì)胞
HT1080 KL1157 人成纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞
SK-N-DZ KL1158 人成神經(jīng)瘤細(xì)胞-骨髓 SK-N-DZ細(xì)胞
HS683 KL1159 人成年皮膚成纖維細(xì)胞,HS683細(xì)胞
MEG-01 KL1160 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞,MEG-01細(xì)胞